1998 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトBACライブラリーを用いた脳神経系疾患原因遺伝子の探索

Research Project

Project/Area Number	10176231
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	浅川修一慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30231872)
Keywords	BAC / パーキンソン病 / 若年性パーキンソニズム / AR-JP / Parkin / エキソン欠失 / ユビキチン / リングフィンガー
Research Abstract	若年性パーキンソニズム(AR-JP)は連鎖解析によって6q25.2-q27にマップされていた。さらにこの患者の1名においてマーカーD6S305が欠失していることが見いだされた。こららの情報をもとに我々が作製した慶應BACライブラリーを駆使してポジショナルクローニングを進め、AR-JP原因遺伝子Parkinを同定することに成功した。同遺伝子はゲノム上で1Mbにも及ぶ巨大遺伝子で12エキソンから構成されていた。ノーザンブロット解析の結果、同遺伝子の転写物約4.5kbで心筋、骨格筋、脳等で発現していた。そのうちコーディング配列1.4kbを含む2.9kbのcDNA構造を明らかにした。我々が確立したQ-Bee法を用いてエキソン・イントロン構造、およびエキソン両側のイントロン構造を明らかにし、各エキソンにおける遺伝子変異を検索するためのPCRプライマーを設計した。その結果、複数のタイプのエキソン欠失、ポイントミューテーションを発見し、同遺伝子をAR-JPの原因遺伝子と特定することができた。遺伝子変異の大部分はエキソン3、4、5を中心としたエキソン欠失であった。 cDNAから予想される蛋白質はN末にユビキチンと相同性を持ち、C末にリングフィンガー様ドメインを持つ465残基のポリペプチドであるがその機能はまだ不明である。また高頻度エキソン欠失の機構やスプライシング認識機構の解明などの点でも興味深い遺伝子である。現在この巨大遺伝子のシーケンスをすすめ既に約400kbの塩基配列を明らかにし、欠失を塩基レベルで解析を進めている。また細胞生物学的手法等で同遺伝子産物の機能解析を進めている。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Guipponi M: "Identification and characterization of a novel cyclic nucleotide phosphodiesterase gene(PDE9A)that maps to 21q22.3: alternative splicing of mRNA transcripts,genomic structure and sequence." Hum.Genet.103. 386-392 (1998)
[Publications] Nagamine K: "Molecular cloning of a novel putative Ca2+ channel protein(TRPC7)highly expressed in brain." Genomics. 54. 124-131 (1998)
[Publications] Hattori N: "Molecular genetic analysis of a novel Parkin gene in Japanese families with autosomal recessive juvenile parkinsonism: evidence for variable homozygous deletions in the Parkin gene in affected individuals." Ann.Neurol.44. 935-941 (1998)
[Publications] Hattori N: "Point mutations(Thr240Arg and Ala311Stop)in the Parkin gene." Biochem.Biophys.Res.Commun.62. 1515-1521 (1998)
[Publications] Kitada T: "Mutations in the parkin gene cause autosomal recessive juvenile parkinsonism." Nature. 392. 605-608 (1998)
[Publications] Asakawa S: "High-fidelity digital hybridization screening." Genomics. 49. 209-217 (1998)
[Publications] 浅川修一: "BACライブラリーの作製とヒト遺伝子クローニングへの活用" 医学のあゆみ. 185. 831-835 (1998)
[Publications] 浅川修一: "慶應BACライブラリーを用いた疾患原因遺伝子の探索" 別冊・医学のあゆみ神経細胞死制御. 139-144 (1998)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトBACライブラリーを用いた脳神経系疾患原因遺伝子の探索

Principal Investigator

浅川 修一 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30231872)

Research Products

[Publications] Guipponi M: "Identification and characterization of a novel cyclic nucleotide phosphodiesterase gene(PDE9A)that maps to 21q22.3: alternative splicing of mRNA transcripts,genomic structure and sequence." Hum.Genet.103. 386-392 (1998)

[Publications] Nagamine K: "Molecular cloning of a novel putative Ca2+ channel protein(TRPC7)highly expressed in brain." Genomics. 54. 124-131 (1998)

[Publications] Hattori N: "Molecular genetic analysis of a novel Parkin gene in Japanese families with autosomal recessive juvenile parkinsonism: evidence for variable homozygous deletions in the Parkin gene in affected individuals." Ann.Neurol.44. 935-941 (1998)

[Publications] Hattori N: "Point mutations(Thr240Arg and Ala311Stop)in the Parkin gene." Biochem.Biophys.Res.Commun.62. 1515-1521 (1998)

[Publications] Kitada T: "Mutations in the parkin gene cause autosomal recessive juvenile parkinsonism." Nature. 392. 605-608 (1998)

[Publications] Asakawa S: "High-fidelity digital hybridization screening." Genomics. 49. 209-217 (1998)

[Publications] 浅川 修一: "BACライブラリーの作製とヒト遺伝子クローニングへの活用" 医学のあゆみ. 185. 831-835 (1998)

[Publications] 浅川 修一: "慶應BACライブラリーを用いた疾患原因遺伝子の探索" 別冊・医学のあゆみ 神経細胞死制御. 139-144 (1998)

浅川修一慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30231872)

[Publications] 浅川修一: "BACライブラリーの作製とヒト遺伝子クローニングへの活用" 医学のあゆみ. 185. 831-835 (1998)

[Publications] 浅川修一: "慶應BACライブラリーを用いた疾患原因遺伝子の探索" 別冊・医学のあゆみ神経細胞死制御. 139-144 (1998)