2000 Fiscal Year Annual Research Report
ホスファチジン酸ホスファターゼの新しい機能と作用分子機構の解明
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10212207
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
加納 英雄 札幌医科大学, 医学部, 教授 (70045475)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
甲斐 正広 札幌医科大学, 医学部, 助手 (80260777)
和田 郁夫 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (40182969)
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| Keywords | ホスファチジン酸 / ホスファターゼ / ジアシルグソセロール / リン脂質 / シグナル伝達 |
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| Research Abstract |
ヒトホスファチジン酸ホスファターゼ-2b(PAP-2b)を一過性発現させたHEK293細胞を用いて、PAP-2bが細胞外の基質を分解するエクト型酵素であることを証明した。この酵素は膜中の長鎖ホスファチジン酸を分解できない特性を持つ。PAP-2bは、Triton-X-100不溶性で、非カベオラ性のラフトに存在するが、PAP-2aはTriton可溶性である。しかし、PAP-2aもCHAPSなどほかのdetergentに対しては不溶性であり、2bとは別の表面膜ミクロドメインに存在することが分かった。現在2bと2aのキメラ分子をNIH3T3に発現させ、Triton不溶性をおこすドメインを特定中である。PAP-2a,PAP-2bの安定発現MDCK細胞を確立して解析中である。極性を示すMDCK細胞では、2aは細胞先端(apical surface)に、また2bは細胞基底部(basolateral surface)に明確に分離して存在する新しい知見を得た。2a,2bは異なった細胞表面ミクロドメインに分離して存在しており、両者の分化した機能を強く示唆する結果を得ている。
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[Publications] Ishikawa,Tadataka: "Cell surface activity of the human type 2b phosphatidic acid phosphatase"J.Biochem.. 127. 645-651 (2000)
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[Publications] Jiang,Ying: "The diacylglycerol kinase inhibitor, R59949, is selective for calcium-activated diacylglycerol kinase"Biochem.Pharmacol.. 59. 763-772 (2000)
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[Publications] Taguchi,J.: "Different expression of calreticulin and immunoglobulin binding protein in alzheimer's disease Brain"Acta Neuropathologica. 100. 153-160 (2000)
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[Publications] Kanoh,Hideo: "Molecular characterization of the type 2 phosphatidic acid phosphatase"Chem.Phys.Lipids.. 98. 983-988 (1999)
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[Publications] Toyofuku,K.: "Promotion of tyrosinase folding in Cos7 cells by calnexin."J.Biochem.. 125. 82-89 (1999)
