1999 Fiscal Year Annual Research Report
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10213202
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
馬渕 一誠 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 教授 (40012520)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤本 宏隆 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助手 (90300722)
枝松 正樹 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 助手 (60251328)
足立 博之 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00211699)
中野 賢太郎 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 助手 (50302815)
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| Keywords | 細胞質分裂 / アクチン繊維 / ミオシン / 分裂シグナル / Rho / 収縮環 / 分裂溝 / アクチン調節タンパク質 |
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| Research Abstract |
1.細胞質分裂シグナル伝達: 分裂酵母のRhoの活性化因子GEF、抑制因子GAPのクローニングを行った。ウニ卵のCdc42の下流因子としてIQGAPを同定しその精製を進めている。細胞性粘菌のIQGAP様タンパク質DGAP1が分裂溝に集積すること示した。2つのIQGAP様タンパク質GAPAとDGAP1が互いに依存せずに同じタイミングで分裂溝に集積することを欠損株を用いて示し、分裂溝収縮における共通の機能を示唆した。また、細胞性粘菌Racを5種rhoGDIを1種同定し、細胞内の局在を決定し、後者について遺伝子破壊が細胞質分裂の欠陥を起こすことを証明した。
2.収縮環の形成機構: シグナルのアクチンヘの伝達を行なう候補として分裂酵母の数種類のアクチン調節遺伝子を同定した。このうちAdf1が収縮環の形成だけでなくアクチンパッチにも局在すること、アクチンパッチが細胞内で動き回ることを見い出した。ミオシンに関してはMyo2,Myo3が分裂に必要であること、分裂溝に局在することを確認した。Myo2はまず点状に細胞中央部に集合し、次いで収縮環にパックされること、点状集合にはアクチンは必要ないことを明らかにした。軽鎖結合部位欠失重鎖の発現はmyo2遺伝子破壊の表現型を抑圧した。
3.分裂溝の構成成分、収縮環の微細構造: 分裂酵母の収縮環形成の過程を詳しく調べ、分裂前期にアクチンケーブルの星状体様構造ができ、そこから先導ケーブルが伸びて細胞を取り巻き第1次収縮環となることを見い出した。ウニ卵単離分裂溝の構成成分と考えられるEF1α、EF1βの細胞内注入を行ない、分裂が阻害されることを見た。
4.分裂酵母の分裂面決定シグナルの研究: 分裂面決定に関与するmid1遺伝子の機能調節因子の同定を試みた。生化学的解析でMid1とアクチン繊維、微小管との結合性が示唆された。
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[Publications] Suda, M.: "Overproduction of clongation factor 1α, an essential translational component, causes aberrant cell morphology by affecting the control of growth polarity in fission yeast"Genes to Cells. 4. 517-527 (1999)
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[Publications] Sayers, Lee G.: "Rho-dependence of Schizosaccharomyces pombe Pck2"Genes to Cells. in press. (2000)
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[Publications] Motegi, F.: "Molecular mechanism of myosin-II assembly at the division site in Schizosaccaromyces pombe"J. Cell Sci.. in press. (2000)
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[Publications] T. Kon: "amiB, a novel gene required for the growth/differentiation transition in Dictyostelium"Genes to Cells. 5. 43-55 (2000)
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[Publications] K.Tanaka: "Identification pf protein kinaseB (PKB) as a phosphatidylinositol 3,4,5-trisphophate binding protein in Dictyostelium discoideum"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 63. 368-372 (1999)
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[Publications] M. Yazu: "Novel Dictyostelium Unconventional Myosin Myok Is a Class I Myosin with the Longest Loop-1 Insert and the Shortest Tail"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 255. 711-716 (1999)
