2000 Fiscal Year Annual Research Report
ABC蛋白スーパーファミリーによる異物排出機構の解析
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10217202
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
鈴木 洋史 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助教授 (80206523)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 将夫 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助手 (30251440)
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| Keywords | 胆汁酸 / 有機アニオン / 胆汁排泄 / MRP2 / MRP3 / BSEP / trans-inhibition / 肝潅流 |
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| Research Abstract |
胆汁酸の胆汁中への排泄は、肝細胞の有する重要な生理的機能の1つである。本研究では、胆管側膜上に発現され、胆汁排泄に関わるABCトランスポーター機能について検討を加えた。一価の胆汁酸排泄に関与するbile salt export pump(BSEP)、硫酸およびグルクロン酸抱合型胆汁酸の排泄に関与するmultidrug resistance associated protein 2(MRP2)を組換え型baculovirusを用いてSf9細胞に感染させ、膜ベシクルを用いて輸送実験を行った。また、胆管側膜にMRP2とBSEPを共に発現する正常ラット、およびMRP2発現が欠損している変異ラット(EHBR)より、胆管側膜ベシクルを調製し、実験に用いた。BSEP基質となるtaurocholate輸送に対する硫酸抱合型胆汁酸の影響を調べたところ、BSEP単独発現膜(BSEP発現Sf9細胞膜、EHBR胆管側膜)におけるKi値は、MRP2/BSEP共発現膜(MRP2/BSEP共発現Sf9細胞膜、正常ラット胆管側膜)におけるKi値よりも数十倍大きいことが明らかとなった。さらに、硫酸抱合型胆汁酸を、MRP2/BSEP共発現膜にpreloadすると、taurocholate輸送に対する阻害効果が増大することが示された。これらの結果は、生理的条件下では、硫酸抱合型胆汁酸はMRP2により胆汁排泄を受け、胆管側からBSEPをtrans-inhibitionすることを示唆しており、胆汁うっ滞形成におけるABCトランスポーターの役割が示された。また、胆汁うっ滞時に肝細胞血管側膜上に発現されるMRP3がBSEP基質(一価胆汁酸)およびMRP2基質(硫酸抱合型胆汁酸)共に輸送する能力を有することを示すことができた。さらに、肝潅流実験を行うことにより、実際にMRP3がin vivoでも機能しうることを示すことができた。これらの結果は、胆管側膜上に発現されるABCトランスポーターの機能が低下した時に、血管側膜上にMRP3が発現誘導され、機能を補償することにより肝細胞機能を維持することを示唆している。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] T.Hirohashi: "ATP-dependent transport of bile salts by rat multidrug resistance-associated protein 3 (MRP3)."J.Biol.Chem.. 275. 2905-2910 (2000)
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[Publications] H.Akita: "Characterization of bile acid transport mediated by multidrug resistance associated protein 2 ahd bile salt export pump."Biochim.Biophys.Acta. 1511. 7-16 (2001)
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[Publications] H.Suzuki: "Transport of drugs across the hepatic sinusoidal membrane : Sinusoidal drug influx and efflux in the liver."Semin.Liv.Dis.. 20. 251-263 (2000)
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[Publications] H.Suzuki: "Hepatocellular extrusion of bile acids by ABC transporters."In "Biology of bile acids in health and disease" ed. by van Berge Henegouwen GP, Keppler D, Leuschner U, Paumgartner G and Stiehl A (Kluwer), Kluwer Academic Publishers. (2001)
