1998 Fiscal Year Annual Research Report
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10220207
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
岡本 仁 理化学研究所, 発生遺伝子制御研究チーム, チームリーダー(研究職) (40183769)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北村 邦夫 三菱化学生命科学研究所, プロジェクト6, 研究員
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| Keywords | ゼブラフィッシュ / ホメオドメイン蛋白 / Islet-3 / 中脳分化 / 中脳後脳境界部 / サブトラクション / ディファレンシャルディスプレイ / 小脳分化 |
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| Research Abstract |
1:サブトラクション法による中脳および中脳後脳境界部形成因子の探索
正常胚及びLIM過剰発現胚の頭部(中脳後脳境界部及びそれより前方部)よりRNAを調製し、cDNAのサブトラクションを行った。サブトラクションで得られた約2000クローンについてディファレンシャルハイブリダイゼーションを行い、目や視蓋原基、中脳後脳境界部などに特異的に発現しているクローンを10個得た。この内で視蓋原基や中脳後脳境界部に発現するものは3クローン得られた。一つは317アミノ酸からなるタンパク質をコードする新規遺伝子である(クローン#533)。Islet-3のLIMドメインを過剰発現することによって、中脳後脳境界部の形成に必要な遺伝子pax2、eng2、wntlの発現が受精後約14時間目あたりから減少し始めることが知られている。クローン#533はLIM過剰発現胚の中脳後脳境界部では受精後14時間目で既に発現がみられない。これらのことからクローン#533はIslet-3によるpax2、eng2、Wmlの発現調節に深く関与する分子である可能性がある。2:Differential Disp1ay法による検索
我々は現在、サブトラクションに相補的な方法としてDifferential Display法を用いて、Isle-3の下流因子を検索している。正常胚とIslet-3のLIM領域を過剰発現する胚の、中脳および中脳後脳境界部から単離したtotal RNAを出発材料として、DiffercntialDisplay法によって合計約26,000本のバンドを比較したところ、172本のバンドが、LIM過剰発現胚において現弱しており、124本のバンドが増強していた。現在これらのバンドを単離し、各々に対応するmRNAの発現パターンを解析中である。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Kikuchi, Y., Segawa, H., Tokumoto, M., Hotta, Y., Uyemura, K., and Okamoto, H.: "Islet-3 in the regional specification of the brain." pp108-114 in Neural Development Uyemura, K., Kawamura, K., Yazaki, T., eds., Springer.108-114 (1998)
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[Publications] Higashijima, S., Okamoto, H., Ueno, N., Hotta, Y., and Eguchi, G.: "High-frequency generation of transgenic zebrafish which reliably express GFP in whole muscles or the whole body by using prooter of zebrafish origin." Developmental Biology. 192. 289-299 (1998)
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[Publications] Higashijima, S., Nose, A., Eguchi, G., Hotta, Y., and Okamoto, H.: "Mindin/F-spondin family:novel ECM proteins expressed in the zebrafish embryonic axis." Developmental Biology. 192. 211-227 (1997)
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[Publications] 岡本 仁: "ゼブラフィッシュのHox遺伝子から見た脊椎運動の進化と多様化" 生体の科学. 49. 546-554 (1998)
