1999 Fiscal Year Annual Research Report

マウス飽和ミュータジェネシス・プロジェクト:遺伝子欠失突然変異マウス精子バンクの作製と変異マウス・スクリーニング系の開発

Research Project

Project/Area Number	10358019
Research Institution	National Institute of Genetics
Principal Investigator	城石俊彦国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 教授 (90171058)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	若菜茂晴財団法人実験動物中央研究所, 研究プロジェクト推進センター, 室長代理 (90192434) 小出剛国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 助手 (20221955)
Keywords	染色体欠失変異 / 日本産野生マウス / クロラムブシル / 精子凍結 / RLGSマッピング / マイクロサテライトマーカー
Research Abstract	1)RLGS法による染色体欠失の検出と突然変異率の推定:CHLを投与されたMSM雄をC3H/HeJ雌に交配して得られた(C3H/HeJ×MSM)F1個体のゲノムDNAをNotl-Pvull-Pstlで消化した後にRLGS解析を行った。この結果、1枚の二次元展開した電気泳動ゲル当たり174個のMSM系統由来の多型スポットが判別できた。最も染色体欠失の頻度が高くなると推定されたCHL投与条件(6mg/kg体重)で得られた(C3H/HeJ×MSM)F1個体30個体分について解析したところ、合計4つのスポットの欠失が観察された。以上のデータからマウスゲノム上全体の染色体欠失頻度を計算すると、4/174(多型スポット数)×30(個体数)=0.76×10-3となった。この値は、従来の特定座位法で推定されてきた値と良く対応している。 2)染色体欠失を持った凍結精子バンクの構築:現時点で、至適条件で染色体欠失を誘導した(C3H/Hej×MSM)F1個体の雄合計101個体からなる凍結精子バンクを作製した。これらの各個体のゲノムには、平均して76(=105×0.76×10-3)遺伝子座において欠失が生じていると推定される。 3)マイクロサテライトマーカーDNAの多型検出:CHL <検出するため、第4染色体上にマップされている多数のマイクロサテライトマーカーについて、F1個体を作製したC3H/HeJ系統とMSM系統の組み合わせで多型的なものを検索し、多型が容易に検出できる条件を設定した。多型は、基本的にヌシーブアガロース電気泳動を用いたが、PCRで増幅したDNA断片のLength Polymorphismが明瞭でないものは、ポリアクリルアミドゲル電気泳動も用いた。この結果、二つの染色体上の欠失の検出目的で使用できるマーカーセットを確定することができた。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Sato, H. et al.: "The Genomic organization of type I keratin genes in mice"Genomics,. 56. 303-309 (1999)
[Publications] Komine, Y. et al.: "A novel type of non-coding RNA expressed in the rat brain"Mol. Brain Res.. 66. 1-13 (1999)
[Publications] Moriwaki, K. et al.: "Multiple genes governing biological functions in the genetic backgrounds of laboratory mice and Asian wild mice"Prog. Exp. Tumor Res. Basel, Karger. 35. 1-12 (1999)
[Publications] Shum, A.S. et al.: "Retinoic acid induces down-regulation of Wnt-3a, apoptosis and diversion of tail bud cells to a neural fate in the mouse embryo"Mech. Dev.. 84. 17-30 (1999)
[Publications] Shimizu, K. et al.: "The autocrine motility factor receptor gene encodes a novel type of seven transmembrane protein"FEBS letter 456: 295-300,1999. 456. 295-300 (1999)
[Publications] Ueda, Y. et al.: "Nucleotide sequences of the mouse globin beta cDNAs in a wild derived new haplotype Hbbwl"Mammal. Genome. 10. 879-882 (1999)
[Publications] Hattori, M. et al.: "Cutting edge : homelogous recombination of the MHC class I K region defines new MHC-Linked diabetogenic susceptibility gene(s) in nonobese diabetic mice"J. Immunol. 163. 1721-1724 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

マウス飽和ミュータジェネシス・プロジェクト:遺伝子欠失突然変異マウス精子バンクの作製と変異マウス・スクリーニング系の開発

Principal Investigator

城石 俊彦 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 教授 (90171058)

Research Products

[Publications] Sato, H. et al.: "The Genomic organization of type I keratin genes in mice"Genomics,. 56. 303-309 (1999)

[Publications] Komine, Y. et al.: "A novel type of non-coding RNA expressed in the rat brain"Mol. Brain Res.. 66. 1-13 (1999)

[Publications] Moriwaki, K. et al.: "Multiple genes governing biological functions in the genetic backgrounds of laboratory mice and Asian wild mice"Prog. Exp. Tumor Res. Basel, Karger. 35. 1-12 (1999)

[Publications] Shum, A.S. et al.: "Retinoic acid induces down-regulation of Wnt-3a, apoptosis and diversion of tail bud cells to a neural fate in the mouse embryo"Mech. Dev.. 84. 17-30 (1999)

[Publications] Shimizu, K. et al.: "The autocrine motility factor receptor gene encodes a novel type of seven transmembrane protein"FEBS letter 456: 295-300,1999. 456. 295-300 (1999)

[Publications] Ueda, Y. et al.: "Nucleotide sequences of the mouse globin beta cDNAs in a wild derived new haplotype Hbbwl"Mammal. Genome. 10. 879-882 (1999)

[Publications] Hattori, M. et al.: "Cutting edge : homelogous recombination of the MHC class I K region defines new MHC-Linked diabetogenic susceptibility gene(s) in nonobese diabetic mice"J. Immunol. 163. 1721-1724 (1999)

城石俊彦国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 教授 (90171058)