細胞の増殖分化に関わる因子ホスファチジルイノシトール3キナーゼの役割

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10460037
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 福井 泰久 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (00181248)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 永田 諭志 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 講師 (40246682) ; 伊原 さよ子 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (80292788)
• Keywords: リン脂質 / ホシファテシジルイノシトールキナーゼ / 組織応答 / 分化 / アダプター / イノシトールリン脂質 / MAPキナーゼ / ホスホリパーゼ

Research Abstract

ホスファチジルイノシトール3キナーゼは生体内ではPIP_3を生じる。PIP_3は重要な2次メッセンジャーの担い手としていろいろな下流因子の活性化にあずかる。しかし、現在のところ多様なPIP_3の役割を説明するに十分な下流因子が同定されているとは言いがたく、本研究ではあらたなPIP_3結合タンパク質の性質の解明を行った。PIP3BPは核に存在するPIP_3結合タンパク質でArf-GAPと相同性があることから小胞輸送に関与していると考えられる。本年度はすでに同定したPIP3BP結合タンパク質BPキネシンを研究するため、モノクローナル抗体を作成した。また、一方ではあらたにSWAP70と呼ばれるタンパク質をPIP_3結合タンパク質として同定した。このタンパク質はB細胞特異的recombinaseのサブユニットと言われており、immunoglobulinのクラススイッチとの関係に興味がもたれる。SWAP70の局在を調べたところ、細胞質に限局していたが、活性型ホスファチジルイノシトール3キナーゼを共発現させたところ、核にも移行することがわかった。この移行はホスファチジルイノシトール3キナーゼ阻害剤に感受性であったため、PIP_3と結合することが核移行になんらかの役割を果たしていることが示唆された。また、SWAP70を昆虫細胞で大量発現させ、精製した。精製したタンパク質を用いて試験管内での核移行を検討した。その結果、試験管内ではSWAP70はATP依存性に核に移行することがわかった。この系を用いてのPIP_3の役割の検討が待たれる。

Research Products

• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Downstream of phosphatidylinositol-3 kinase,a multifunctional signaling molecule,and its regulation in cell responses"J.Biochem. 124. 1-7 (1998)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Specific detection of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate binding proteins by the PIP3 analogue beads : an application for rapid purification of the PIP3 binding proteins"Biochim Biophys Acta.. 24. 292-302 (1998)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Microinjection of activated phosphatidylinositol-3 kinase induces process outgrowth in rat PC12 cells through the Rac-JNK signal transduction pathway"J Cell Sci.. 111. 907-915 (1998)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Density dependent elevation of phosphatidylinositol-3 kinase level in rat 3Yl cells"Biochim Biophys Acta.. 1401. 113-120 (1998)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Synthesis of diacylglycerol analogs of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate"Tetrahed.Let.. 39. 9485-9488 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Dedifferentiation of Adenocarcinomas by Activation of Phosphatidylinositol 3-kinase"Proc Natl Acad Sci USA. 96. 4874-4879 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "The structural requirement of phosphatidylinositols as substrate of phosphatidylinositol 3-kinase"Tetrahed.Let.. 40. 1693-1696 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Cyclin D1 expression mediated by phosphatidylinositol 3-kinase through mTOR-70S6K-independent signaling in growth factor-stimulated NIH3T3 fibroblasts"Mol.Cell.Biol.. 19. 1346-1358 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Increased insulin sensitivity and hipoglycemia in mice lacking p85a regulatory subunit of phosphoinositide 3-kinase"Nat.Genet.. 21. 230-235 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "An evidence that a phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate binding protein can function in nucleus"J.Biol Chem.. 274. 3919-3922 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Identification of protein kinasa B (PKB) as a phosphatidylinostitol 3,4,5-trisphosphate binding protein in Dictyostelium discoideum"Biosci.Biotech.Biochem.. 63. 368-372 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Adenoviral gene transfer of activated phosphatidylinositol 3'-kinase and Akt inhibits apoptosis of hypoxic cardiomyocytes in vitro"Circulation. 100. 2373-2379 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "Dedifferentiation of adenocarcinomas by activation of phosphatidylinositol 3-kinasa"Proc Natl Acad Sci USA. 96. 4874-4879 (1999)
• [Publications] Fukui,Y.,et al.: "In vitro and in vivo suppression of osteoclast function by adenovirus vector-induced csk gene"J.Bone Miner Res.. 15. 41-51 (2000)