Q熱リケッチアの感染防禦抗原の分子構築

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10460140
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 平井 克哉 岐阜大学, 農学部, 教授 (30021702)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 増澤 俊幸 静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (10181645) ; 山口 剛士 岐阜大学, 農学部, 助手 (70210367) ; 福士 秀人 岐阜大学, 農学部, 助教授 (10156763)
• Keywords: Q熱リケッチア / Coxiella burnetii / 感染防禦抗原 / Q熱の診断 / 病原性支配遺伝子

Research Abstract

国内外から分離されたQ熱リケッチア(Coxiella burnetii)は、1)日本分離株のリポ多糖体(LPS)およびポリペプチド構造を海外分離株を比較解析し、野外にはLPS構造の異なるI相型、II相型および中間型の菌が存在し、病原性と関連すること、2)60,46,42,27,20および14.7KDaポリペプチドが主要な外膜蛋白質を構成し、特に27KDaポリペプチドが感染防禦抗原を担うこと、3)低分子量(33〜14KDa)のポリペプチド構成と抗原性は株により異なり5群に分けられること、4)27KDa外膜蛋白質を支配する遺伝子(Coml)をクローニングし、その塩基配列は相同生が極めて高いが、急性および慢性例由来株により、またダニや宿主由来株により、特定の遺伝子が異なり4群に分けられること、5)感染防禦抗原(27KDaポリペプチド)を大腸菌とバキュロウイルスに発現させ、発現感染防禦抗原はマウスの系で感染防禦能を示すこと、6)この抗原は診断用のELISAやラテックス凝集反応用抗原などに応用可能であること、7)27および60KDaポリペプチド支配遺伝子は株共通の保存領域があり、PCRによる高感度遺伝子診断用のプライマーとして設計できること、8)16SrRNAの塩基配列は株間で99.4%以上の高い相同性を示し、本菌は1属1種であること、9)主要外膜蛋白質の60,46,42,27,20および14.7KDaポリペプチドを認識するモノクロナール抗体を79種作出し、由来宿主や病原性により型別できる可能性があること、などの成果が得られた。
さらに、本菌の感染防禦抗原および病原性支配遺伝子の解析を行って、ヒトや動物に感染・発症されるQ熱リケッチアは、どのような遺伝子配列を持つのか、その分子構築の解明を進めている。また、哺乳類・鳥類からダニ由来Coxiella株を細分類あるいは型別し、感染源や感染環を把握する分子疫学的解析を展開している。

Research Products

• [Publications] Hirai,K.& To H.: "Advances in the understanding of Coxiella burnetii infection in Japan." J.Vet.Med.Sci.60. 781-790 (1998)
• [Publications] Zhang,G.Q.et al: "Clinical evaluation of new polymerase chain reaction assay for detection of Coxiella burnetii in human serum samples." J.Clin.Microbiol.36. 77-80 (1998)
• [Publications] Zhang,G.Q.et al: "Evaluation of a recombinant 27-kDa outer membrane protein of Coxiella burnetii as animmunodiagnostic reagent." Microbiol.Immunol.42. 423-428 (1998)
• [Publications] Zhang,G.Q.et al: "Direct identification of Coxiella burneti plasmids in human sera by nested polymerase chain reaction" J.Clin.Microbiol.36. 2210-2213 (1998)
• [Publications] To,H.et al: "Antigenic variation in the polypeptides of Coxiella burnetii isolates." Microbiol.Immunol.42. 81-85 (1998)
• [Publications] To,H.et al: "Evidence of Coxiella burnetii infection in domestic and wild birds in Japan." J.Wildlife Dis.34. 310-316 (1998)
• [Publications] To,H.et al: "Prevalence of Coxiella burnetii infection in dairy cattle with reproductive disorders." J.Vet.Med.Sci.60. 859-861 (1998)
• [Publications] 平井克哉: "系統分類学-リケッチア-" AD&S. 14. 19-23 (1998)
• [Publications] 平井克哉: "Q熱(コクシエラ症)" 日本小動物獣医師会誌(JSAVA). 38. 41-45 (1998)
• [Publications] 山添 文他: "髄膜炎を伴うQ熱の1例" 日本小児科学会雑誌. (印刷中). (1998)
• [Publications] Sawaishi,Y.et al: "Life-threatening acute gerebellitis caused by coxiella burnetii." Annals of Neurology.(印刷中). (1998)
• [Publications] 平井克哉: "Q熱に関する最近の情報" 日獣会誌. 52. 77-83 (1999)
• [Publications] 平井克哉: "人獣共通感染症-リケッチア・クラミジア" 学窓社, 27 (1998)