1999 Fiscal Year Annual Research Report
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10470037
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
田村 眞理 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (20124604)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平賀 章 東北大学, 加齢医学研究所, 助教授 (80134047)
高井 俊行 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (20187917)
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| Keywords | 環境ストレス / SAPKシグナル伝達路 / プロテインホスファターゼ2C / TAK1 |
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| Research Abstract |
研究目的
これまでに我々は、COS7細胞における共発現システムを利用して、PP2CがSAPKシグナル伝達路の抑制因子として機能することを報告した。これを受けて本研究では、SAPKシステムを構成するMKKKの一種であるTAK1シグナル伝達路における、PP2Cの作用点を同定することを目的とした。
方法と結果
TAK1をCOS7細胞で発現させると、共発現させたMKK4およびMKK6が活性化されたが、それらのMKKの活性化はPP2C beta-1の共発現により抑制された。TAK1とTAB1をCOS7細胞で共発現させると、TAK1が自己リン酸化により活性化されるとともに、そのSDS-PAGE上の泳動度が低下するが、PP2C beta-1の共発現により、TAK1の泳動度の低下が解除された。また、TAK1はin vitroで、PP2C beta-1により直接脱リン酸化され、不活性化された。さらに、NIH3T3細胞の内因性のPP2C betaが内因性のTAK1と免疫共沈することが判明した。以上の結果から、PP2C betaが細胞内でTAK1と会合し、これを直接脱リン酸化することにより、下流へのシグナルの伝達を抑制することが示された。
考察
PP2C betaとTAK1との会合が直接的なものか、それともスカッフォードタンパク質を介するものかが不明である。さらに、両者の会合状態が、炎症性サイトカインやストレス刺激によってTAK1が活性化される過程で変化するのか否かも不明であり、これらの問題解決が今後に残された課題である。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Hiraga A.& Tamura S.: "Protein Phosphatase 2A is associated in an inactive state with microtubules through 2A1-specific interaction with tubulin"Biochem. J.. (in press).
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[Publications] Hishiya A.,Ohnishi M.,Tamura S.& Nakamura F.: "Protein phosphatase 2C inactivates F-actin binding of human platelet moesin"J. Biol. Chem.. 274. 26705-26712 (1999)
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[Publications] Ohnishi M.,Chida N.,Kobayashi T.,Wang H.,Ikeda S.,Hanada Y.,Yanagawa Y.,Katsura K.,Hiraga A. & Tamura S.: "Alternative promoters direct tissue-specitic expression of the mouse protein phosphatase 2C beta gene"Eur. J. Biochem.. 263. 736-745 (1999)
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[Publications] Yamamoto M.,Suzuki Y.,Kihira H.,Miwa H.,Kita K.,Nagao M.,Tamura S.,Siku H.& Nishikawa M.: "Expressions of four major protein ser / thr phosphatases in human primary leukemic cells"Leukemia. 13. 565-600 (1999)
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[Publications] Yanagawa Y.,Kobayashi T.,Ohnishi M.,Kobayashi T.,Tamura S.,Tsuzuki T.,Sanbo M.,Yagi T.,Tashiro F.& Miyazaki J.: "Enrichment and efficient screening of ES cells containing a targeted mutation: the use of DT-A gene with the polyadenylation signal as a negative selection marker"Transgenic Res.. 8. 215-221 (1999)
