1999 Fiscal Year Annual Research Report

神経芽細胞種における自然退縮の分子機構とその治療への応用

Research Project

Project/Area Number	10470044
Research Institution	Chiba Cancer Center Research Institute
Principal Investigator	中川原章千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 部長 (50117181)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中村洋子千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (60260254) 影山肇千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (50260253) 尾崎俊文千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (40260252) 磯貝恵理子千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (40300917)
Keywords	Neuroblastoma / regression / spoptosis / TrkA / MYCN / GDNF / Survivin / p73
Research Abstract	(1)神経芽細胞腫新鮮組織材料を用いた解析過去3年間に全国の施設から送られてきた600例の経芽細胞腫新鮮組織材料を対象に、DNA ploidy、MYCN増幅、TrkA発現、1p36 loss of heterozygosity(LOH)について解析した。その結果、自然退縮する腫瘍は、aneuploidy,single copy of MYCN,TrkA高発現,1p36LOHなし,と相関するが,なかでもTrkA発現レベルが予後を大きく左右する因子であることが明らかになった。 (2)神経芽細胞腫細胞株を用いた神経細胞死の分子機構の解析神経芽腫培養細胞CHP134を用いて、GDNF/Retシグナルによって抑制されるレチノイン酸誘導神経細胞死のin vitroシステムを確立し、その分子機構を解析した。その結果、1)Caspaseファミリー分子では、Caspase-1,3,9の発現誘導と活性化が見られたが、その他のCaspasesは変化しなかった。5つのIAPファミリー遺伝子の中では、Survivinのみが強く発現抑制された。2)p53の経路では、p21^<WAF1>の一過性誘導がみられたが、Bax,PIG3,Mdm2などの誘導は見られなかった。3)ミトコンドリアの膜電位の低下が見られた。4)この細胞死は、グリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)またはニュールチュリン(NTN)の存在下で抑制することができた。したがって、レチノイン酸誘導神経細胞死は、ミトコンドリア=>Caspase-9,3の死シグナル経路の活性化が中心となっているものと思われた。しかしながら、GDNF/NTNによる神経細胞死抑制の分子機構については今後さらに解析する必要がある。 (3)新規細胞死抑制分子、Survivinの機能解析近年、進行神経芽細胞腫において高頻度に17qゲインが見られることが明らかになってきたが、我々はSurvivin(-α)がその原因遺伝子のひとつである可能性を示した。さらに、活性領域であるBIRドメインにインサートの入った新規スプライスバリアント(Survivin-βと命名)を見出し、βが機能消失型であることを示し、αとβがmicrotubuleへの結合において競合することを明らかにした。したがって、Survivinは神経芽細胞腫の生存と細胞死を制御する重要な分子であることが強く示唆された。 (4)発生過程における神経細胞死の制御に重要な役割を果たしているp73の機能について解析した。その結果、p53には存在しないp73のCOOH-末端領域が転写活性化能を負に、アポトーシス誘導能を正に制御していることを見出した。

Research Products
(13 results)

All Other

All Publications (13 results)

[Publications] Takada N.,Nakagawara A.et al.: "Identification of a transactivation activity in the carboxy-terminal region of p73 which is impaired in the naturally occurring mutants found in human neuroblastomas"Cancer Res.. 59. 2810-2814 (1999)
[Publications] Ozaki T.,Nakagawara A.et al.: "Deletion of the COOH-terminal region of p73 α enhances both its transactivation function and DNA-binding activity but inhibits induction of apoptosis in mammalian cells"Cancer Res.. 59. 5902-5907 (1999)
[Publications] Sunahara M.,Nakagawara A.et al.: "Mutational analysis of p51A/TAp63γ,a p53 homolog,in non-small cell lung cancer and breast cancer"Oncogene. 18. 3761-3765 (1999)
[Publications] Ichimiya S.,Nakagawara A.et al.: "p73 at chromosome 1p36.3 is lost in advanced stage neuroblastoma but its mutation is infrequent"Oncogene. 18. 1061-1066 (1999)
[Publications] Kato S.,Nakagawara A.et al.: "Transcriptional activities of p51/p63 missense mutations on the p53-downstream gene promoters"Cancer Res.. 59. 5908-5911 (1999)
[Publications] Ikawa S.,Nakagawara A.et al.: "p53 family genes : structural comparison,expression and mutation"Cell Death Differ.. 6. 1151-1161 (1999)
[Publications] Kaneko Y.,Nakagawara A.et al.: "Disomy 1 with terminal 1p deletion was frequent in mass screening-negative/late presenting neuroblastomas in young children, but not in mass screening-positive neuroblastomas in infants"Int.J.Cancer. 80. 54-59 (1999)
[Publications] Han S.,Nakagawara A.et al.: "Infrequent somatic mutations of the p73 gene in various human cancers"Eur.J.Surg.Oncol.. 25. 194-198 (1999)
[Publications] Yang H-W.,Nakagawara A.et al.: "Development of a polyclonal antibody with defined specificity against synthetic peptides from the N-myc oncoprotein, using multiple antigen peptide and hemocyanin conjugation methods"J.Pediatr.Surg.. 34. 454-460 (1999)
[Publications] Nishio S.,Nakagawara A.et al.: "Thoracic paravertebral genglioneuroma with high immunohistochemical expression of TrkA"Neuropathol.. 19. 54-56 (1999)
[Publications] Hirai M.,Nakagawara A.et al.: "1q23 gain is associated with progressive neuroblastoma resistant to aggressive treatment"Genes Chromosomes Cancer. 25. 261-269 (1999)
[Publications] Sugimoto N.,Nakagawara A.et al.: "The human caspase-activated Dnase(CAD)gene : genomic structure,exonic single-nucleotide polymorphisms, and a highly polymorphic dinucleotide repeat at the CAD locus"J.Hum.Genet.. 44. 408-411 (1999)
[Publications] Kaneko Y.,Nakagawara A.et al: "Disomy 1 with terminal 1p deletion was frequent in mass screening-negative/late presenting neuroblastomas in young children, but not in mass screening-positive neuroblastomas in infants"Int.J.Cancer. 80. 54-59 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

神経芽細胞種における自然退縮の分子機構とその治療への応用

Principal Investigator

中川原 章 千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 部長 (50117181)

Research Products

[Publications] Takada N.,Nakagawara A.et al.: "Identification of a transactivation activity in the carboxy-terminal region of p73 which is impaired in the naturally occurring mutants found in human neuroblastomas"Cancer Res.. 59. 2810-2814 (1999)

[Publications] Ozaki T.,Nakagawara A.et al.: "Deletion of the COOH-terminal region of p73 α enhances both its transactivation function and DNA-binding activity but inhibits induction of apoptosis in mammalian cells"Cancer Res.. 59. 5902-5907 (1999)

[Publications] Sunahara M.,Nakagawara A.et al.: "Mutational analysis of p51A/TAp63γ,a p53 homolog,in non-small cell lung cancer and breast cancer"Oncogene. 18. 3761-3765 (1999)

[Publications] Ichimiya S.,Nakagawara A.et al.: "p73 at chromosome 1p36.3 is lost in advanced stage neuroblastoma but its mutation is infrequent"Oncogene. 18. 1061-1066 (1999)

[Publications] Kato S.,Nakagawara A.et al.: "Transcriptional activities of p51/p63 missense mutations on the p53-downstream gene promoters"Cancer Res.. 59. 5908-5911 (1999)

[Publications] Ikawa S.,Nakagawara A.et al.: "p53 family genes : structural comparison,expression and mutation"Cell Death Differ.. 6. 1151-1161 (1999)

[Publications] Kaneko Y.,Nakagawara A.et al.: "Disomy 1 with terminal 1p deletion was frequent in mass screening-negative/late presenting neuroblastomas in young children, but not in mass screening-positive neuroblastomas in infants"Int.J.Cancer. 80. 54-59 (1999)

[Publications] Han S.,Nakagawara A.et al.: "Infrequent somatic mutations of the p73 gene in various human cancers"Eur.J.Surg.Oncol.. 25. 194-198 (1999)

[Publications] Yang H-W.,Nakagawara A.et al.: "Development of a polyclonal antibody with defined specificity against synthetic peptides from the N-myc oncoprotein, using multiple antigen peptide and hemocyanin conjugation methods"J.Pediatr.Surg.. 34. 454-460 (1999)

[Publications] Nishio S.,Nakagawara A.et al.: "Thoracic paravertebral genglioneuroma with high immunohistochemical expression of TrkA"Neuropathol.. 19. 54-56 (1999)

[Publications] Hirai M.,Nakagawara A.et al.: "1q23 gain is associated with progressive neuroblastoma resistant to aggressive treatment"Genes Chromosomes Cancer. 25. 261-269 (1999)

[Publications] Sugimoto N.,Nakagawara A.et al.: "The human caspase-activated Dnase(CAD)gene : genomic structure,exonic single-nucleotide polymorphisms, and a highly polymorphic dinucleotide repeat at the CAD locus"J.Hum.Genet.. 44. 408-411 (1999)

[Publications] Kaneko Y.,Nakagawara A.et al: "Disomy 1 with terminal 1p deletion was frequent in mass screening-negative/late presenting neuroblastomas in young children, but not in mass screening-positive neuroblastomas in infants"Int.J.Cancer. 80. 54-59 (1999)

中川原章千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 部長 (50117181)