リポ蛋白(a)の動脈硬化発生における役割-トランスジェニックウサギを用いた研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10470046
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 渡辺 照男 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40037396)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 范 江霖 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (60272192)
• Keywords: アポ蛋白(a) / リポ蛋白(a) / トランスジェニックウサギ / 動脈硬化 / 冠状動脈硬化 / 高脂血症 / リポ蛋白代謝 / 遺伝子操作ウサギ

Research Abstract

ヒトアポ蛋白(a)高発現トランスジェニックウサギ(TGウサギ)founder line(A01 line)を交配しF1ウサギを作製し、得られたF1ウサギの解析とコレステロール食投与の影響を検討した。このA01lineウサギの血清アポ(a)は〜1.8mg/dlであり、ヒトアポ蛋白mRNAは主として肝臓と腎臓に発現していた。肝では肝細胞に発現していることを免疫染色並びにin situ hybridizationにより確認した。血清中ではヒトアポ蛋白(a)はヒトと同様にpre-β部位に泳動した。80%のアポ(a)は血清中でLDLと結合し、ヒトにおけると同様にリポ蛋白(a)を形成していることが判明した。繁殖をくり返し、複数のTGウサギを得ることができたので、比較的低濃度の0.3%コレステロール食で16週間飼育し、大動脈とその主幹動脈、並びに冠状動脈病変について病理学的に検索した。大動脈、頚動脈、腸骨動脈おける病変の広がり(SI)は、コントロールウサギがそれぞれ16.8%,6.1%,3.4%であったのに比べ、TGウサギでは27.8%,12.3%,12.3%と有意に高く、TGウサギにおける動脈硬化促進作用が明らかであった。また、冠状動脈については内腔狭窄率を測定したが、コントロールウサギの19.4%の狭窄率に比し、TGウサギでは42%と有意に亢進しており、同様にヒトアポ(a)発現による冠動脈硬化促進作用が明らかであった。組織学的に、初期ではほぼ正常に見える内膜の内皮細胞下に、脂肪斑やプラークなどの動脈硬化巣では病変部の細胞外基質に一致したアポ(a)の沈着が見られた。現在、これらの病変形成機序を含め、詳細について検討を加えているところである。

Research Products

• [Publications] Fan.J, and Watanabe,T: "Human apo(a) transgenic rabbit as a useful model for the study of Human Lp(a)"Annual of New York Acad, Sci.In press. (2000)
• [Publications] Fan.J, Iwasa,S and Watanabe,T: "Role of endothelin in atheroselerosis"Annual of New York Acad, Sci.In press. (2000)