1998 Fiscal Year Annual Research Report
マスト細胞の表現形質に対するmi転写因子異常の影響
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10470057
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
北村 幸彦 大阪大学, 医学部, 教授 (70028520)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 彰彦 大阪大学, 医学部, 助手 (80273647)
森井 英一 大阪大学, 医学部, 助手 (10283772)
実宝 智子 大阪大学, 医学部, 助手 (70252658)
足立 史朗 大阪大学, 医学部, 助手 (40301254)
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| Keywords | MITF / 転写因子 / マスト細胞 / cDNAライブラリー / サブトラクション・ライブラリー / mi遺伝子座 / ミュータントマウス / トランスジェニックマウス |
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| Research Abstract |
マウスのmi遺伝子座にコードされている転写因子MITFの機能について調べた。mi遺伝子座の突然変異のうち最も著明な症状を示すのはmi/miマウスである。mi突然変異遺伝子によりコードされている蛋白mi-MITFはbasic領域に4個ならぶアルギニンのうちの1個が欠失するため、DNA結合能を完全に失うと共に、核移行能にも明らかな欠陥を有する。一方tg/tgマウスではMITF自身のコーディング領域の上流に移入された遺伝子が挿入されたために、MITFがまったく発現されなくなる。tg/tgマウスの症状はmi/miマウスに似るが、その程度はmi/miマウスの方が重症である。mi/miとtg/tgの差を調べるため、+/+マウス、mi/miマウスtg/tgマウスの骨髄細胞を培養して、培養マスト細胞を得、おのおのの培養マスト細胞からcDNAライブラリーを作製した。(+/+-mi/mi)と(+/+-tg/tg)の2種のサブトラクションライブラリーを作ると、(+/+mi/mi)サブトラクション中には(+/+-tg/tg)サブトラクションライブラリーに比し多くのクローンが検出された。mi-MITFが発現する方が、MITFを全く発現しない場合に比し、発現する遺伝子が少ないわけで、mi-MITFは負の転写活性化能を持っていることがわかった。次にMITFがその転写に関係していることが知られている遺伝子について、ノーザンプロットによりmi/miマウスとtg/tgマウスでメッセンジャー(m)RNA量に差があるかどうか調べた。調べた遺伝子の大部分で、mi/mi培養マスト細胞におけるmRNA量はtg/tg培養マスト細胞におけるmRNA量より低く、サブトラクションライブラリーで得た結果と一致した。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Ito A,Kitamura Y et al: "Systematic method to obtain novel genes that are reg-ulated by mi transcription factor (MITF)" Blood. 91. 3210-3221 (1998)
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[Publications] Sata,M,Kitamura et al: "Transcription regulation of osteopontin gene in vivo by PEBP2 A/CBAF,and ETS1 in the skeletal tissues" Oncogene. 17. 1517-1525 (1998)
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[Publications] Kim DK,Kitamura Y et al: "Impaired expression of alpha-4 subunit in cultured mast cells derived from mutant mice of mi/mi genotype" Blood. 92. 1973-1980 (1998)
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[Publications] Lee YM,Kitamura Y et al: "Alteration of protease expression phenotype of mouse peritoneal mast cells by changing the microenvironment" American Journal of Pathology. 153. 391-936 (1998)
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[Publications] Berin MC,Kitamura et al: "The influence of mast cells on pathways of trans-epithelial antigen transport in rat intestine" Journal immunology. 161. 2561-2566 (1998)
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[Publications] Ito A.Kitamura Y et al: "Inhibitory effect of the transcription factor encoded by the mi mutant allele in cultured mast cells" Blood. (in press).
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[Publications] Kitamura Y,et al: "Hematopoietic Lineages:Regulation of Cell Pro-duction and Development" marcell dekker,New York(in press),
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[Publications] Kitamura Y,et al: "Signal Transduction in Mast Cells and Basophils" Springer-Verlag,New York(in press),
