1998 Fiscal Year Annual Research Report

etsファミリーがん遺伝子による赤血球分化阻害の分子機構

Research Project

Project/Area Number	10470063
Research Institution	Sasaki Institute
Principal Investigator	及川恒之佐々木研究所, 細胞遺伝部, 部長 (80150241)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山元ひとみ佐々木研究所, 細胞遺伝部, 研究員 (30290977) 根岸文子佐々木研究所, 細胞遺伝部, 研究員 (40177902) 山田俊幸佐々木研究所, 細胞遺伝部, 主任研究員 (20183981)
Keywords	PU.1 / Ets / がん遺伝子 / 白血球 / 細胞増殖 / 分化 / アポトーシス
Research Abstract	われわれはこれまで、マウス赤白血病(MEL)の原因遺伝子であるetsファミリーPU.1がん遺伝子をME1細胞に発現させ、同時に分化誘導剤DMSOで処理すると、分化阻害と増殖抑制とアポトーシスが起こることを見い出し、その分子機構を解析してきた。本年度はPU.1過剰発現による増殖抑制の分子機構をc-myc,c-myb,c-fosプロモターのレポーターアッセイを行なった。レポーター遺伝子とともにets-1あるいはets-2発現ベクターを導入するとそれらの活性はdose dependentに増強されたが、レポーター遺伝子とともにPU.1発現ベクターを導入するとレポーター遺伝子の活性は逆に量依存性に抑制された。現在、Etsファミリー転写因子間の競合も含め、詳細な分子機構をさらに検討している。われわれは、PU.1には転写補助因子であるCBPが結合することを見い出したが、欠損変異株を用いたGST pull down assayにより、PU.1の転写活性化ドメイン(74〜122a.a.)とCBPのC末のE1A結合領域とオーバーラップする部位(1283〜1915a.a.)とが結合することが分かった。また、レポーターアッセイからCBPはPU.1の転写補助因子としても作用することが明らかとなった。 Dfferential Display法によりPU.1過剰発現により発現が変動する遺伝子の塩基配列を決定し、遺伝子の同定を行なった。150前後の遺伝子を同定したが、半数は既知の、半数は未知の遺伝子であった。前者には血球細胞の増殖に関与するいくつかの遺伝子や神経系細胞の分化機能に関与するいくつかの興味ある遺伝子が含まれていた。今後、これらの遺伝子をMEL細胞に導入して、上記現象が生じるかを検討する予定である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] F.Kihara-Negishi, et al: "Down-regulation of c-Myc and Bcl-2 gene expression in PU.1-induced Apoptosis in murine erythroleukemia cells" International Journal of Cancer. 76. 523-530 (1998)
[Publications] N.Kondoh, et al: "Enhaced expression of the urokinase-type plasminogen activator gene and reduced colony formation in soft agar by ectopic expression of PU.1 in HT1080 human fibrosarcoma cells" British Journal of Cancer. 6. 718-723 (1998)
[Publications] T.Yamada, et al: "Reduction of DNA binding activity of the GATA-1 transcription factor in the apoptotic process induced by overexpression of PU.1 in murine erythroleukemia cells" Experimental Cell Research. 245. 186-194 (1998)
[Publications] H.Yamamoto, et al: "Physical and functional interactions between the transcription factor PU.1 and the coactivator CBP" Oncogene. 18. 1495-1501 (1999)
[Publications] 橋本嘉幸、及川恒之: "細胞の増殖・分化とアポトーシス" 医学のあゆみ.第5土曜特集「アポトーシス」. 187. 298-304 (1998)
[Publications] 山元ひとみ.及川恒之: "Etsファミリー転写因子PU.1の機能エアクチベーターCBPを介した転写調節" 蛋白質・核酸・酵素. 印刷中. (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

etsファミリーがん遺伝子による赤血球分化阻害の分子機構

Principal Investigator

及川 恒之 佐々木研究所, 細胞遺伝部, 部長 (80150241)

Research Products

[Publications] F.Kihara-Negishi, et al: "Down-regulation of c-Myc and Bcl-2 gene expression in PU.1-induced Apoptosis in murine erythroleukemia cells" International Journal of Cancer. 76. 523-530 (1998)

[Publications] N.Kondoh, et al: "Enhaced expression of the urokinase-type plasminogen activator gene and reduced colony formation in soft agar by ectopic expression of PU.1 in HT1080 human fibrosarcoma cells" British Journal of Cancer. 6. 718-723 (1998)

[Publications] T.Yamada, et al: "Reduction of DNA binding activity of the GATA-1 transcription factor in the apoptotic process induced by overexpression of PU.1 in murine erythroleukemia cells" Experimental Cell Research. 245. 186-194 (1998)

[Publications] H.Yamamoto, et al: "Physical and functional interactions between the transcription factor PU.1 and the coactivator CBP" Oncogene. 18. 1495-1501 (1999)

[Publications] 橋本嘉幸、及川恒之: "細胞の増殖・分化とアポトーシス" 医学のあゆみ.第5土曜特集「アポトーシス」. 187. 298-304 (1998)

[Publications] 山元ひとみ.及川恒之: "Etsファミリー転写因子PU.1の機能 エアクチベーターCBPを介した転写調節" 蛋白質・核酸・酵素. 印刷中. (1999)

及川恒之佐々木研究所, 細胞遺伝部, 部長 (80150241)

[Publications] 山元ひとみ.及川恒之: "Etsファミリー転写因子PU.1の機能エアクチベーターCBPを介した転写調節" 蛋白質・核酸・酵素. 印刷中. (1999)