1999 Fiscal Year Annual Research Report
気道におけるセリン蛋白分解酵素阻害物質リダンダンシィと特異的主理の解析
Project/Area Number |
10470150
|
Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
貫和 敏博 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (40129036)
|
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
三木 誠 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (30312656)
萩原 弘一 東北大学, 加齢医学研究所, 講師 (00240705)
海老名 雅仁 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (10280885)
宮崎 純一 大阪大学, 教授 (10200156)
|
Keywords | 蛋白分解酵素阻害物質 / SLPI / elafin / targeting |
Research Abstract |
1)SLPI遺伝子ノックアウトマウス作成 a)ES細胞の作成 平成10年度に完了したマウスSLPI遺伝子targeting constructを用い、共同研究者大阪大学宮崎教授の指導の下に大阪大学においてES細胞へのelectroporationを用い、screeningを行ったが、遠隔地の往復等の条件もあり、何度かの試行の後、大阪大学での作成は断念した。東北大学加齢医学研究所遺伝子導入研究分野、高井教授の指導の下に仙台でES細胞への導入を行い、5^1,3^1のPCRによる判定で約300コロニー中4コロニーにおいて、targeting constructのhomologus recombinationを得た。再度詳細にconstructを検討したところ、southern blotting band濃淡より、SLP遺伝子のduplicationの可能性が指摘されたため、約2ケ月をかけてSLPI遺伝子がsingle copyであることを確認した。これら経過のためキメラ個体作成の前段階で研究進行が停止し、年度末を迎えたが、本研究はさらに延長して、少なくともノックアウト個体が致死か致死でないかを確認するまで継続する予定である。 2)マウスelafin遺伝子のクローニング 平成10年度に続き、ヒト、ブタelafin遺伝子の高ホモロニー領域をdegeneration primerでnested PRCを繰り返したがシグナルがなかった。さらに方法を工夫し、長いguessmerを用いてマウスplacenta cDNA library screeningしたところ、強いシグナルを得たのでこれを確認している段階である。
|
Research Products
(8 results)
-
[Publications] Sato G.: "Prognositic value of nucleolar protein p120 in patients with resected lung adenocarcinoma"J Clin Oncol 17. 1-7 (1999)
-
[Publications] Satoh K.: "Diminution of 37-kDa laminin binding protein expression reduces tumor formation of murine lung cancer cells"Br J Cancer 80. 1115-1122 (1999)
-
[Publications] Mori Y.: "Chromosome band 16q24 is frequently deleted in human gastric cancer"Br J Cancer 80. 556-562 (1999)
-
[Publications] Saijyo Y.: "Autologous high-killing cytotoxic T lymphocytes against human lung cancer are induced using 1E-1B, 9L-2, 1L-4 and 1L-6"Clin Cancer Res 5. 1203-1209 (1999)
-
[Publications] Suzuki T.: "Bilateral pneumothoraces with multiple ballae in a patient with asymptomatic bronchiolitis obliterams 10 years after bone marrow transplantion"Bone Marrow Transplantation 23. 829-831 (1999)
-
[Publications] Tahara M.: "Hepatocyte growth factor leads to recovery from alcohol-induced fatty liver in rats"J Clin Invest 103. 313-320 (1999)
-
[Publications] 貫和敏博: "呼吸器疾患の分子生物学"医学書院. 447 (1998)
-
[Publications] 貫和敏博: "内科学I"文光堂. 1104 (1999)