ミトコンドリアβ酸化異常症の生化学的評価・診断および病因解析に関する研究

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10470178
• Research Institution: Shimane Medical University
• Principal Investigator: 山口 清次 島根医科大学, 医学部, 教授 (60144044)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 近藤 直実 岐阜大学, 医学部, 教授 (50124714)
• Keywords: β酸化異常症 / 先天代謝異常 / 質量分析 / グルタル酸尿症2型 / 極長鎖アシル-CoA脱水素酵素欠損症 / 乳児突然死症候群

Research Abstract

平成12年度には以下の研究成果を得た.
1)酵素評価法の確立:以下の酵素活性、評価法を確立した.カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ2型活性測定、エノイル-CoAヒドラターゼ、3-ヒドロキシアシル-CoA脱水素酵素活性測定、放射性同位体ラベル脂肪酸の取込みによる脂肪酸β酸化評価法を確立した.
2)血液ろ紙中遊離脂肪酸測定によるβ酸化異常症の診断法の確立:ガスリーろ紙の3mmパンチ5枚を用いてエッペンドルフチューブ内でメチル化してGC/MS分析する簡便なβ酸化異常スクリーニング法を確立した.これによりβ酸化異常症11例の診断を試み全例診断できた.
3)日本人の極長鎖アシル-CoA脱水素酵素(VLCAD)欠損症の遺伝子解析:以前日本人VLCAD欠損症患者は2例が知られていたが、本研究でさらに5例を診断した.うち3例の遺伝子解析と発現実験によって病因を明らかにした.合計5症例の臨床像と遺伝子型を比較して一定の傾向のみられることを明らかにした.
4)グルタル酸尿症2型(GA2)日本人患者の遺伝子解析:以前日本人GA2患者ETFβ欠損症同胞例が知られていた.我々は、日本人としてETFα欠損症2例を同定し遺伝子変異を明らかにした.また2家系目のETFβ欠損症を同定した.
5)日本人β酸化異常症の疫学調査:β酸化異常症は、特に欧米を中心に1980年代から注目されてきた疾患である.日本ではまだ関心が低いと思われるので、1985年〜2000年の間に診断されたβ酸化異常症約60例について、発症時期、発症形態、診断法、予後についてアンケート調査した.最も多いのはCPT2欠損症、ついでGA2であった.発症形態は年令によって特徴的な傾向のあることが示された.

Research Products

• [Publications] Fu X-W: "Simplified screening for organic acidemia using GC/MS and dried urine filter paper : a study on neonatal mass screening"Early Human Development. 58. 41-55 (2000)
• [Publications] Ohie T: "Gas chromatography-mass spectrometry with tert-butyldimethylsilyl derivatization : use of the simplified sample preparations and the automated data system to screen for organic acidemias"J Chromat B. 746. 63-73 (2000)
• [Publications] Iga M: "Rapid, simplified and sensitive method for screening fructose-1,6-diphosphatase deficiency by analyzing urinary metabolites in urease/ direct preparations and gas chromatography-mass spectrometry in the selected-ion monitoring mode"J Chromat B. 746. 75-82 (2000)
• [Publications] Fukao T: "Succinyl-CoA : 3-ketoacid CoA transferase (SCOT) : cloning of the human SCOT gene, tertiary structural modeling of the human SCOT monomer, and characterization of three pathogenic mutations"Genomics. 68(2). 144-151 (2000)
• [Publications] 山口清次: "先天代謝異常と突然死:その病態"小児科診療. 63. 400-407 (2000)
• [Publications] 東条恵: "正常発達をしている乳児期発症、軽症型グルタル酸尿症II型の1例"脳と発達. 32. 163-168 (2000)
• [Publications] 山口清次: "有機酸(先天代謝異常)"日本臨床(別冊:領域別症候群シリーズ29,神経症候群IV). 398-409 (2000)
• [Publications] 山口清次: "ミトコンドリアβ酸化異常症の病態と臨床的特徴"小児科. 42. 70-82 (2001)
• [Publications] Fukao T: "Myopathic form of very-long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency : Evidence for temperature-sensitive mild mutations in both mutant alleles in a Japanese girl"Pediatr Res. 49. 227-231 (2001)