表皮細胞の発生・分化におけるPOUドメイン転写因子の役割に関する研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10470185
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 玉井 克人 弘前大学, 医学部・附属病院, 講師 (20236730)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 今 淳 弘前大学, 医学部, 助手 (60271798) ; 澤村 大輔 弘前大学, 医学部・附属病院, 講師 (60196334)
• Keywords: ケラチノサイト / POUドメインファクター / sknla / 類天疱瘡抗原

Research Abstract

1) 培養ヒト表皮ケラチノサイト由来mRNAをテンプレートとして,POUドメインファクターを,保存領域の配列をプライマーに用いてRT-PCR法にて増幅し,得られたPCR産物について塩基配列を決定した。その結果,sknla(oct-11)およびoct-6がクローニングされた。
2) POUドメインファクターが結合し,転写制御活性を持つことが知られているオクタマー配列を,表皮性プロモーターである230kD類天庖瘡抗原(BPAG1)遺伝子プロモーター上流に接続し,プロモーター活性に与える影響を検討した。その結果,オクタマーモチーフの接続によりプロモーター活性は増強し,その増強効果は4個のオクタマーが連結された時に最強を示し,6個では2個の時と同じ増強活性を有した。
3) sknlaの抗ヒトモノクロナール抗体を用いて,正常ヒト表皮におけるsknlaの発現を検討した。その結果,表皮基底層では細胞質が均質に染色され,有棘層で核内へと移行することが明らかになった。さらに,表皮の増殖亢進と異常角化を病態とする尋常性乾癬では,基底層から有棘層に分化してもsknlaは細胞質内にとどまり,有棘層上層で核内移行する,いわゆるdelayed nuclear translocationが観察された。