1998 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗原ノックアウトマウスを用いた自己免疫疾患モデル動物の開発

Research Project

Project/Area Number	10470189
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木春巳慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (70235985) 小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684) 天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563) 清水宏慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (00146672)
Keywords	自己免疫性皮膚疾患 / 天疱瘡 / 動物モデル / デスモグレイン / 自己抗体 / 免疫寛容 / 抗体産生B細胞 / ノックアウトマウス
Research Abstract	本研究の目的は、自己免疫性水水疱疾患である尋常性天疱瘡に焦点を絞り、標的抗原であるデスモグレイン3ノックアウトマウス(Dsg3-/-)を用いて、天庖瘡モデルマウスを作成することにある。抗原蛋白を遺伝子操作により欠失させてあるノックアウトマウス(-/-)においては、免疫系の発生過程において抗原蛋白によるT・B細胞の除去が起こらず、免疫寛容が成立していない。そこで、Dsg3-/-マウスにrDsg3を免疫することにより、効率よく病的活性を持つ抗体を誘導できると考えられる。本年度は、マウスDsg3の組換え蛋白(マウスrDsg3)をバキュロウイルス発現系を用いて作製した。種々のDsg3+/+野生型マウスでは、マウスrDsg3を免疫しても、マウスDsg3に対する抗体価は上昇しなかった。ところが、Dsg3-/-マウスにマウスrDsg3を免疫したところ効率よく、マウスDsg3に対する抗体を産生した。免疫したマウスDsg3-/-の牌細胞を分離し、Rag2-/-マウスに移植したところRag2-/-マウス内にて、抗Dsg3IgG抗体が持続的に産生することが確認された。さらに、移植後3週前後にて、Rag2-/-マウスの体重減少が認められ、口腔内を生検してみると、尋常性天疱瘡に特徴的な所見である表皮基底細胞直上で表皮内水疱形成(Suprabasil aracantholysis)が認められた。以上の結果より、2種のノックアウトマウスを使用することにより、天疱瘡のモデルマウスが作製されたことになる。来年度は、さらに、抗体産生の持続性、各臓器の病理組織学的所見、抗体産主に関与するBおよびT細胞の検討を行う予定である。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Hertl M, Karr RW,Amagai M,Katz SI: "Heterogeneous MHC II restriction pattern of autoreactive desmoglein 3 specific T cell responses in pemphigus vulgaris patients and normals" J Invest Dermatol. 110. 388-392 (1998)
[Publications] Amagai M, Nishikawa T, Nousari HC,Anhalt GJ, Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3 (pemphigus vulgaris antigen) are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholysis in vivo in neonatal mice" J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)
[Publications] Amagai M, Tsunoda K, Zillikens D, Nagai T, Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile" J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)
[Publications] Proby C, Fujii Y, Owaribe K, Nishikawa T,Amagai M: "Human autoantibodies against HD1/plectin in paraneoplastic pemphigus" J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)
[Publications] Mahoney MG, Wang Z, Rothenberger KL, Koch Pj,Amagai M, Stanley JR: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris" J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)
[Publications] Amagai M, Komai A, Hashimoto T, Shirakata Y, Hashimoto K, Yamada T, Kitajima Y, Ohya K, Iwanami H, Nishikawa T: "Usefulness of enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)using recombinant desmogleins 1 and 3 for serodiagnosis of pemphigus" Br J Dermatol. 140. 351-357 (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗原ノックアウトマウスを用いた自己免疫疾患モデル動物の開発

Principal Investigator

西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)

Research Products

[Publications] Hertl M, Karr RW,Amagai M,Katz SI: "Heterogeneous MHC II restriction pattern of autoreactive desmoglein 3 specific T cell responses in pemphigus vulgaris patients and normals" J Invest Dermatol. 110. 388-392 (1998)

[Publications] Amagai M, Nishikawa T, Nousari HC,Anhalt GJ, Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3 (pemphigus vulgaris antigen) are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholysis in vivo in neonatal mice" J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)

[Publications] Amagai M, Tsunoda K, Zillikens D, Nagai T, Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile" J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)

[Publications] Proby C, Fujii Y, Owaribe K, Nishikawa T,Amagai M: "Human autoantibodies against HD1/plectin in paraneoplastic pemphigus" J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)

[Publications] Mahoney MG, Wang Z, Rothenberger KL, Koch Pj,Amagai M, Stanley JR: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris" J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)

[Publications] Amagai M, Komai A, Hashimoto T, Shirakata Y, Hashimoto K, Yamada T, Kitajima Y, Ohya K, Iwanami H, Nishikawa T: "Usefulness of enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)using recombinant desmogleins 1 and 3 for serodiagnosis of pemphigus" Br J Dermatol. 140. 351-357 (1999)

西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)