1999 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗原ノックアウトマウスを用いた自己免疫疾患モデル動物の開発

Research Project

Project/Area Number	10470189
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684) 天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563) 清水宏慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (00146672) 鈴木春巳慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (70235985)
Keywords	自己免疫性皮膚疾患 / 天疱瘡 / 動物モデル / デスモグレイン / 自己抗体 / 免疫寛容 / 抗体産生B細胞 / ノックアウトマウス
Research Abstract	自己免疫性疾患において実験動物モデルを作成することは、その発症メカニズムを知る上において極めて重要である。本研究の目的は、自己抗原ノックアウトマウスが、欠失している蛋白に対し免疫寛容が成立していないことを利用して、全く新しい方法により自己免疫モデルマウスを作成することにある。具体的には、自己免疫性水疱性疾患である尋常性天疱瘡に焦点を絞り、標的抗原であるデスモグレイン3ノックアウトマウス(Dsg3-/-)を用いて、天疱瘡モデルマウスを作成することにある。バキュロウイルス発原系を用いて作製したマウスDsg3の組換え蛋白(マウスrDsg3)を用いて、Dsg3-/-マウスに免役したところ、in vivoでDsg3に反応できる抗体を産生した。さらに、免疫したマウスDsg3-/-の脾細胞を分離し、Rag2-/-マウスに移植したところRag2-/-マウス内にて、抗Dsg3IgG抗体が6ヶ月以上の長期間産生することが確認された。さらに、移植後3週前後にて、Rag2-/-マウスの体重減少が認められ、口腔内には、尋常性天疱瘡に特徴的な所見である表皮基底細胞直上で表皮内水疱形成(Suprabasilar acantholysis)が認められた。さらに、詳しい病理学的検討により、頭部、四肢、躯幹の皮膚、舌、頬粘膜、食道上部などの重層扁平上皮のいかなるところにも同様の水疱形成が認められることが確認された。さらに、移植する際の脾細胞をT細胞、B細胞に分離後、種々の組み合わせて移植したところ、T細胞のみならずB細胞レベルにおいても免疫寛容が成立していないことが、病的自己抗体産生に必要であることが示唆された。当研究で開発されたモデルマウスは、自己抗体産生機序の解明に有用であるばかりでなく、疾病特異的治療法の開発する上で重要なツールとなると考えられる。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Mahoney MG,Wang Z,Rothenberger KL,Koch PJ,Amagai M,Stanley JR.: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris"J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)
[Publications] Wu H,Wang ZH,Yan A,Lyle S,Fakharzadeh S,WahlJK,Wheelock MJ,Uitto J,Amagai M,Stanley JR.: "Protection of neonates against pemphigus foliaceus by desmoglein 3"N Eng J Med. (in press). (2000)
[Publications] Ishii K,Amagai M,Komai A,et al.: "Desmoglein 1 and desmoglein 3 are the target autoantigens in herpetiform pemphigus"Arch Dermatol. 135. 943-947 (1999)
[Publications] Nishifuji K,Amagai M,Kuwana M,Iwasaki T,Nishikawa T: "Detection of antigen-specific B cells in patients with pemphigus vulgaris by enzyme-linked immunospot(ELISPOT)Assay:requirement of T cell collaboration for autoantibody production"J Invest Dermatol. 114. 88-94 (2000)
[Publications] Proby CM,Ohta T,Suzuki H,et al.: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris"Br J Dermatol. (in press). (2000)
[Publications] Amagai M,Tsunoda K,Suzuki H,Nishifuji K,Koyasu S,Nishikawa T: "Use of autoantigen knockout mice to develop an active autoimmune disease model of pemphigus"J Clin Invest. (in press). (2000)
[Publications] Amagai M: "Advances in pemphigus foliaceus and pemphigus vulgaris"In D.Dyall-Smith&R.Marks(Eds.),Dermatology at Millennium:Proceeding of 19th World Congress of Dermatology New York:Parthenon Publishing. 812 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗原ノックアウトマウスを用いた自己免疫疾患モデル動物の開発

Principal Investigator

西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)

Research Products

[Publications] Mahoney MG,Wang Z,Rothenberger KL,Koch PJ,Amagai M,Stanley JR.: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris"J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)

[Publications] Wu H,Wang ZH,Yan A,Lyle S,Fakharzadeh S,WahlJK,Wheelock MJ,Uitto J,Amagai M,Stanley JR.: "Protection of neonates against pemphigus foliaceus by desmoglein 3"N Eng J Med. (in press). (2000)

[Publications] Ishii K,Amagai M,Komai A,et al.: "Desmoglein 1 and desmoglein 3 are the target autoantigens in herpetiform pemphigus"Arch Dermatol. 135. 943-947 (1999)

[Publications] Nishifuji K,Amagai M,Kuwana M,Iwasaki T,Nishikawa T: "Detection of antigen-specific B cells in patients with pemphigus vulgaris by enzyme-linked immunospot(ELISPOT)Assay:requirement of T cell collaboration for autoantibody production"J Invest Dermatol. 114. 88-94 (2000)

[Publications] Proby CM,Ohta T,Suzuki H,et al.: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris"Br J Dermatol. (in press). (2000)

[Publications] Amagai M,Tsunoda K,Suzuki H,Nishifuji K,Koyasu S,Nishikawa T: "Use of autoantigen knockout mice to develop an active autoimmune disease model of pemphigus"J Clin Invest. (in press). (2000)

[Publications] Amagai M: "Advances in pemphigus foliaceus and pemphigus vulgaris"In D.Dyall-Smith&R.Marks(Eds.),Dermatology at Millennium:Proceeding of 19th World Congress of Dermatology New York:Parthenon Publishing. 812 (1999)

西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)