末梢神経損傷後の再生過程における発現分子の経時的変化の解析および導入〜再生修復時に発現誘導される既知、未知の分子定量および臨床応用の検討を中心に〜

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10470310
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 平澤 泰介 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (40079851)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡島 誠一郎 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (70305580)
• Keywords: 末梢神経 / 神経再生 / 遺伝子導入 / RLCS / 免疫組織化学 / 免疫電顕 / PCR / クローニング

Research Abstract

本研究では、まず末梢神経損傷後の神経細胞における遺伝子発現状態について、RLCS法を用い経時的に観察した。ラット坐骨神経に圧挫損傷を加えた後、1,3,5,7日目の脊髄前角領域を採取しRLCSプロファイルを作製後、未処理ラット脊髄前角領域のRLCSプロファイルと比較検討した。全1991種の遺伝子に対し、37種の遺伝子が変動していた。変動率は1.9%であった。これら37種の遺伝子の経時的変動パターンは23種類に分類された。これらのパターンは、「持続性発現亢進パターン」「一過性発現亢進パターン」「発現低下パターン」の3種類に大別された。発現変動する遺伝子のうち約6割が一過性に発動誘導されるものであり、このことは末梢神経損傷後、神経細胞で神経再生分子機構が複雑に制御されることを反映するものと考えた。さらに発現変動する遺伝子のクローニングとその塩基配列の決定を試み、一過性に発現変動する遺伝子としてuridine kinase遺伝子のラットホモログを同定した。今回、末梢神経損傷後7日目にこの遺伝子の発現が誘導されることを初めて見いだした。

Research Products

• [Publications] Morihara T.: "Distribution of synaptosomal-associated protein 2.5 in nerve growth cones and reduction of neurite outgrowth by botulinum neurotoxin a without altering growth cone morphology in dorsal root ganglion neurons and PC-12 cells"Neurosciene. 91(2). 695-706 (1999)
• [Publications] Shirasu M.: "Localization of tyrosin-phosphorylated proteins in cultured mouse dorsal root ganglion neurons"J Orthopaedic Research. 16(6). 690-696 (1998)
• [Publications] Nagaoka T.: "Differential expression of gap juction proteins connexin 26,32 and 43 in normal and crush-injured rat sciatic nerves : close relationship between connexin 43 and occludin in the perineurium"J Histochemistry & Cytochemistry. 47(7). 937-948 (1999)
• [Publications] Yuh I.: "Up-regulated uridine kinase gene identified by RLCS in the ventral horn after crush injury to rat sciatic nerves"Biochemical and Biophysical Research Communications. 266. 104-109 (1999)
• [Publications] 岡島誠一郎: "抹消神経端側縫合における再生神経の微細構造"日本手の外科学会誌. 16(4). 499-501 (1999)
• [Publications] 太田光彦: "ヒト膝関節の半月における神経分布"中部整災誌. 42. 887-888 (1999)
• [Publications] 岡島誠一郎: "整形外科術前、術後マネジメント"医学書院. 3 (1998)
• [Publications] 平澤泰介: "整形外科のMRI診断"金芳堂. 35 (1999)