1998 Fiscal Year Annual Research Report

バクテリアのべん毛モーター・トルク発生装置の構造解析

Research Project

Project/Area Number	10480184
Research Institution	Teikyo University
Principal Investigator	相沢慎一帝京大学, 理工学部, 助教授 (50222451)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	馬場則男工学院大学, 工学部, 教授 (80164896) 山口滋明治大学, 商学部, 教授 (30210363) 片山栄作東京大学, 医科学研究所, 助教授 (50111505)
Keywords	サルモネラ菌 / べん毛モーター / トルク発生装置 / 急速凍結法 / 浸透圧ショック法 / モット複合体
Research Abstract	バクテリアのべん毛モーターはプロトン駆動力、すなわち細胞外から細胞内に流れ込む水素イオンによって回転する。このエネルギー変換にATPはいっさい関与していない。水素イオンがべん毛モーターのどの部位とどのように相互作用するのか?本研究はべん毛モーターのトルク発生装置の構造を明らかにするために、急速凍結/ディープエッチ法を用いて、ペリプラズマ空間に存在するはずのトルク発生器の構造を視覚化することを目的とする。本年度は、急速凍結法に供する前の試料の良否を判定するための予備実験として、通常の負染色法による電子顕微鏡観察を行った。サルモネラ菌SJW1103を浸透圧ショック法により処理した細胞のうち、細胞質が透けて見えるもの(浸透圧ショック細胞)は通常数%である。この値はショ糖濃度と希釈倍率を変えても大きくは変化しない。そこで、対数増殖期初期の細胞に対して浸透圧ショック法を行い、低速・高速遠心法を組み合わせによって、未処理細胞の除去を試みたところ、50%以上の高率で浸透圧ショック細胞が得られるようになった。このような試料は急速凍結法に適していると期待される。さらに、スフェロプラスト法によってトルク発生装置の回転子と思われるCリングのついたべん毛の単離も行った。通常、サルモネラ菌では界面活性剤を用いるために固定子であるモット複合体は分解してしまう。ところが、グラム陽性菌の枯草菌ではスフェロプラストを生成すると、Cリングのついたままのべん毛が菌体から分離することが明らかになった。このべん毛にはまだモット複合体が残存している可能性があるので、急速凍結法で観察を試みる。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Koroyasu et.al: "Kinetic analysis of the growth rate of the flagellar hork salmenaiia typhimurium by the population balance method" Biolohysical J.74. 436-443 (1998)
[Publications] Muramoto et.al: "Effect of cellular level of Flik on flagellar hock and filament assembly in Salmcnella typhimurium" J.Mol.Biol.277. 871-882 (1998)
[Publications] Saito et.al: "Flagellar filament elengation can be nupaivd by mutation in the hook protein FlgE of S.typhimurium" Mol.Microbiol.27. 1129-1140 (1998)
[Publications] Kubori et.al: "The inuasion -associated type III protein secretion system forms a supramolecular structure on envelope of s.typhimurium" Science. 280. 602-605 (1998)
[Publications] Aizawa Kubori: "Bacterial flagellation and cell division" Genes to cells. 3. 1-10 (1998)
[Publications] Katayama: "Quick-freeze deep-etch electron microscopy of the actun-heauy meromyosin conplex" J.Mol.Biol.278. 349-367 (1998)
[Publications] 相沢慎一: "バクテリアのべん毛モーター" 共立出版 PNEモノグラフ, 142 (1998)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

バクテリアのべん毛モーター・トルク発生装置の構造解析

Principal Investigator

相沢 慎一 帝京大学, 理工学部, 助教授 (50222451)

Research Products

[Publications] Koroyasu et.al: "Kinetic analysis of the growth rate of the flagellar hork salmenaiia typhimurium by the population balance method" Biolohysical J.74. 436-443 (1998)

[Publications] Muramoto et.al: "Effect of cellular level of Flik on flagellar hock and filament assembly in Salmcnella typhimurium" J.Mol.Biol.277. 871-882 (1998)

[Publications] Saito et.al: "Flagellar filament elengation can be nupaivd by mutation in the hook protein FlgE of S.typhimurium" Mol.Microbiol.27. 1129-1140 (1998)

[Publications] Kubori et.al: "The inuasion -associated type III protein secretion system forms a supramolecular structure on envelope of s.typhimurium" Science. 280. 602-605 (1998)

[Publications] Aizawa Kubori: "Bacterial flagellation and cell division" Genes to cells. 3. 1-10 (1998)

[Publications] Katayama: "Quick-freeze deep-etch electron microscopy of the actun-heauy meromyosin conplex" J.Mol.Biol.278. 349-367 (1998)

[Publications] 相沢慎一: "バクテリアのべん毛モーター" 共立出版 PNEモノグラフ, 142 (1998)

相沢慎一帝京大学, 理工学部, 助教授 (50222451)