1999 Fiscal Year Annual Research Report

組み替え磁気微粒子を用いた小型自動免疫測定ロボットの開発

Research Project

Project/Area Number	10555285
Research Institution	Tokyo University of Agriculture & Technology
Principal Investigator	松永是東京農工大学, 工学部, 教授 (10134834)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田島秀二プレシジョン, システム・サイエンス株式会社, 社長(研究職) 養王田正文東京農工大学, 工学部, 助教授 (50250105) 竹山春子東京農工大学, 工学部, 助教授 (60262234)
Keywords	磁性細菌 / 組み替え磁気微粒子 / 融合遺伝子 / プロテインA / 小型免疫測定ロボット / ヒトIgG
Research Abstract	本年度は、組み換え磁性細菌粒子を作製し、その小型自動免疫測走ロボットのプロトタイプ機への応用を目的とした。プロテインAをディスプレイした組み換え.磁性細菌粒子を作製しその利用性について評価した。本実験で設計した自動免疫測定装置は8本の自動ピペット、8x3本の.チップを有し、反応槽として96穴マイクロタイタープレーを採用した。抗体固走化磁性細菌粒子を磁気回収するB/F分離のステップは、ピペットのチップ内壁で実行できるシステムを採用した。試薬の容量は、抗原溶液、抗体固定化磁性細菌粒子懸濁液の容量を50μlとし、それ以外はクロスコンタミネーションを防ぐために最大反応容積を100μlとした。ここで、自動免疫測定装置による磁気回収率の検計を行った。磁気回収時の吸引/吐出速度として、2.5、5、7.5、15、25秒/サイクルに設定した。その結果、7.5秒1/サイクルにおいて上清中の磁性細菌粒子濃度は、0.1%以下であった。このことから、この条件下における磁気固定時の磁性細菌粒子の損失は無視することができた。磁気固定率、磁気回収率の向上が達成され、粒子分散性を保持し、磁気的回収を効率的に行えるという磁性細菌粒子の優位性を自動免疫ロボットヘ適応することが可能となった。また、サンプルとしてヒトIgGの検出を行ったところ、1pgまでの感度で検出できることが確認ざれ、血清中においても検出が可能であることが示された。また、本測定システムの同時測定誤差は5%以内に収まることが示された。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Tadashi Matsunaga: "Construction of an Automated DNA Detection System for Manipulation of Microcystis spp.Using Specific DNA Probe Immobilized on the Magnetic Particles."Electrochimi. Acta. 44. 3779-3784 (1999)
[Publications] Tae-kyu Lim: "Automated Detection of Anti Double Stranded DNA Antibody in Systemic Lupus Erythematosus Serum by Flow Immunoassay."Anal. Chem. 71. 1289-1302 (1999)
[Publications] T.Matsunaga: "Chemiluminescence enzyme immunoassay using protein A-bacterial magnetite complex."J. Magn. Magn. Mater.. 194. 126-131 (1999)
[Publications] T.Matsunaga: "Cloning and Characterization of a Genemps A, Encoding a protein Associated with Intracellular Magnetic Particles from Magnetospirillum sp. strain AMB-1."Biochem. Biophys. Res. Commun.. 268. 932-937 (2000)
[Publications] Tsuyoshi Tanaka: "A Fully Automated Chemiluminescence Immuoassay of Insulin Using Antibody-Protein A-Bacterial Magnetic Particle Complexes."Anal. Chem.. (in press). (2000)
[Publications] Y.Okamura: "Two-dimensional analysis of proteins specific to the bacterial particle membrane from Magnetospirillum sp. AMB-1."Appl. Biochem. Biotechnol.. (in press). (2000)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

組み替え磁気微粒子を用いた小型自動免疫測定ロボットの開発

Principal Investigator

松永 是 東京農工大学, 工学部, 教授 (10134834)

Research Products

[Publications] Tadashi Matsunaga: "Construction of an Automated DNA Detection System for Manipulation of Microcystis spp.Using Specific DNA Probe Immobilized on the Magnetic Particles."Electrochimi. Acta. 44. 3779-3784 (1999)

[Publications] Tae-kyu Lim: "Automated Detection of Anti Double Stranded DNA Antibody in Systemic Lupus Erythematosus Serum by Flow Immunoassay."Anal. Chem. 71. 1289-1302 (1999)

[Publications] T.Matsunaga: "Chemiluminescence enzyme immunoassay using protein A-bacterial magnetite complex."J. Magn. Magn. Mater.. 194. 126-131 (1999)

[Publications] T.Matsunaga: "Cloning and Characterization of a Genemps A, Encoding a protein Associated with Intracellular Magnetic Particles from Magnetospirillum sp. strain AMB-1."Biochem. Biophys. Res. Commun.. 268. 932-937 (2000)

[Publications] Tsuyoshi Tanaka: "A Fully Automated Chemiluminescence Immuoassay of Insulin Using Antibody-Protein A-Bacterial Magnetic Particle Complexes."Anal. Chem.. (in press). (2000)

[Publications] Y.Okamura: "Two-dimensional analysis of proteins specific to the bacterial particle membrane from Magnetospirillum sp. AMB-1."Appl. Biochem. Biotechnol.. (in press). (2000)

松永是東京農工大学, 工学部, 教授 (10134834)