2000 Fiscal Year Annual Research Report
シアン耐性呼吸酵素遺伝子導入による低温耐性イネ作出のための分子育種学的研究
Project/Area Number |
10556001
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Research Institution | THE UNIVERSITY OF TOKYO |
Principal Investigator |
中園 幹生 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (70282697)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西村 繁夫 筑波大学, 農林学系, 教授 (70089853)
堤 伸浩 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00202185)
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Keywords | イネ / シアン耐性呼吸 / alternative oxidase / 低温耐性 |
Research Abstract |
イネシアン耐性呼吸酵素遺伝子AOX1a及びAOX1bを導入した形質転換イネがそれぞれ17系統、30系統得られた。これらの中からそれぞれAOX1a,AOX1bの発現量の多い系統をウエスタンブロット法で調べ、3系統ずつ選抜した。AOX1a,AOX1bともに、AOXタンパク質の蓄積量のもっとも多い系統は不稔が発生したため、T_1世代の種子を全く得ることができなかった。AOXタンパク質の蓄積量が2,3番目に多い系統については種子を数十粒ずつ獲得できたので、これらの系統についてT_2世代の種子を得るために播種した。平成12年度はT_2種子の獲得が、夏期の障害型耐冷性検定の時期に間に合わなかったため、AOX1a,AOX1b形質転換イネの障害型耐冷性を検定するには至らなかった。これは今後の課題である。 低温以外の環境ストレスである、塩ストレス及び乾燥ストレス条件下においても、AOX1a,AOX1b遺伝子の発現が誘導されるかどうかを、ノーザンハイブリダイゼーションによって調べた。その結果、両遺伝子は塩ストレス及び乾燥ストレス条件下においても、転写レベルでその発現が誘導されることが明らかとなった。さらに、両遺伝子は、植物ホルモンであるアブシジン酸(ABA)処理をイネに対して行ってもその発現は誘導されなかった。従ってイネAOX1a及びAOX1b遺伝子は、ABAの関与する経路とは別の経路によって発現調節を受けている事が明らかとなった。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Nakazono,M. et al.: "Characterization of two cDNA clones encoding rice F_1F_0-ATPase inhibitor proteins, both of which are targeted to mitochondria."Planta. 210. 188-194 (2000)
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[Publications] Tsuji,H. et al.: "Transcript levels of the nuclear-encoded respiratory genes in rice decrease by oxygen deprivation : evidence for involvement of calcium in expression of the alternative oxidase 1a gene."FEBS Lett.. 471. 201-204 (2000)
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[Publications] Li,Y. et al.: "Molecular and cellular characterizations of a cDNA clone encoding a novel isozyme of aldehyde dehydrogenase from rice."Gene. 249. 67-74 (2000)
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[Publications] Nakazono,M. et al.: "Expression of a gene encoding mitochondrial aldehyde dehydrogenase in rice increases under submerged conditions."Plant Physiol.. 124. 587-598 (2000)
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[Publications] Saisho,D. et al.: "ATP synthesis inhibitors as well as respiratory inhibitors increase steady-state level of alternative oxidase mRNA in Arabidopsis thaliana."J.Plant Physiol.. 158. 241-245 (2001)
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[Publications] Ohtsu,K. et al.: "Characterization and expression of the genes for cytochrome c oxidase subunit VIb (COX6b) from rice and Arabidopsis thaliana."Gene. (in press).