1999 Fiscal Year Annual Research Report
有用抗生物質生産 Streptomyces 属放線菌のホルモン様物質検索法の開発
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10556020
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
山田 靖宙 大阪大学, 大学院・工学研究科, 教授 (00011891)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤田 秀和 武田薬品工業株式会社, 主席研究員
木下 浩 大阪大学, 大学院・工学研究科, 助手 (20294035)
仁平 卓也 大阪大学, 大学院・工学研究科, 助教授 (70144441)
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| Keywords | Streptomyces / 放線菌 / オートレギュレーター / 抗生物質生産 |
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| Research Abstract |
有用生理活性物質の主要工業生産菌である放線菌を対象として、広く分布するブチロラクトン型自己調節因子に着目し、形態分化及び物質生産を支配する自己調節因子及びその受容体タンパク質のタイプを迅速・簡易に決定する手法を開発することで、対象菌株の機能をより一層開発する基礎を築く事を目的とする。
1. Enramycin 生産菌S. fungicidicus、maridomycin 生産菌 S.hygroscopicus、lancacidin 生産菌S.rochei、cycloheximide 生産菌 S.albulus,actinomycin 生産菌 S.antibioticus、fibrostatin生産菌 S.albogriseolus 及びS.catenulae、erythromycin 生産菌 Saccharopolyspora erythrae,braumycin 生産菌 S.triangulatus、及びmitomycin 生産菌 S.lavendulae について検討した。
2. リセプター遺伝子に隣接して存在する制御遺伝子の共通保存配列から設計した PCR プライマーを用いて検討した結果、S.lavendulae 及びS.triangulatus有意の増幅断片が見出された。S.triangulatus 断片については約7kbp の断片を Southern Hybirdization により取得した。塩基配列決定により、標的とした制御遺伝子をコードする事、及び隣接してリセプター遺伝子が存在する事が明白となっている。本リセプターは、推定アミノ酸一次配列の比較から、S.lavendulae FRI-5株が保持する IM-2 特異的リセプターFarAとの相同性が高い事が判明している。従って、S.triangulatus は IM-2 型の自己調節因子を持つと、推定される。
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[Publications] Eriko Takano: "Purification structural determination of SCB1,aγ-butyrolactone that elicits antibiotic production in Streptomyces coelicolor A3(2)"J. Biol. Chem.. (In press).
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[Publications] Ryu Kawachi: "Identification of an AfsA homologue(BarX) from Streptomyces virginiae as a pleiotropic regulator controlling autoregulator biosynthesis,virginiamycin biosynthesis and virginiamycin resistance"Mol. Microbiol.. (In press).
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[Publications] Hiroshi Kinoshita: "Characterization of binding sequence for butyrolactone-autoregulator-receptor in Streptomycetes"J. Bacteriol.. 181(16). 5075-5080 (1999)
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[Publications] Shigeru Kitani: "In vitro analysis of the butyrolactone autoregulator receptor protein (FarA)of Streptomyces lavendulae FRI-5 reveals that FarA acts as a DNA-binding transcriptional regulator that controls its own synthesis"J. Bacteriol.. 181(6). 5081-5084 (1999)
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[Publications] Chang-Kwon Lee: "Identification and in vivo functional analysis of a virginiamycin S resistance gene (varS) from Streptomyces virginae"J. Bacteriol.. 181(10). 3293-3297 (1999)
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[Publications] Noriyasu Shikura: "Identification and characterization of 6-dehydro VB-A reductase from Streptomyces antibioticus"FEMS Microbiol. Lett.. 171. 183-189 (1999)
