感染性cDNAを応用した新世代ワクチン:遺伝子補強型狂犬病経口ワクチンの開発

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10556072
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 源 宣之 岐阜大学, 農学部, 教授 (10144007)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 清水 悠紀臣 微生物科学研究所, 所長(研究職) ; 杉山 誠 岐阜大学, 農学部, 助教授 (80196774)
• Keywords: 感染性cDNA / 新世代ワクチン / 経口ワクチン / 遺伝子補強 / 遺伝子組換え / 点変異 / T7プロモーター / 発見ベクター

Research Abstract

犬、家畜及び野生動物に対する安全性、経済性及び有効性の優れた経口ワクチンの開発と実用化を目的として、まず、現在わが国で使用されているワクチン製造株のRC-HL株及びその親株である西ヶ原株から各ゲノム遺伝子をクローニングする。これらに組換え及び点変異により弱毒並びに高い中和抗体を誘導するエピトープをコードする遺伝子領域をさらに加え、高力価で、強い抗体産性能を有する遺伝子補強型の狂犬病ウイルスの感染性cDNAを作出する。本年度は以下の結果が得られ、また実験が進行中である。
1、 RC-HL株とその親株の西ヶ原株の各ゲノム遺伝子を比較したところ、両株間の各コード領域の相同性は塩基配列で98.6%〜99.2%と良く保存されていた。しかし、G遺伝子では比較的低い相同性であった。中でも、その変異はアセチルコリン受容体との推定結合領域に集中していることに注目された。
2、 感染性cDNAの作出のために、N,P,L遺伝子をT7プロモーター遺伝子を保持した発現ベクターに組み込んだ。
3、 N,P,L遺伝子の至適発現量を検討するために、RC-HL株のゲノムの両端とルシフェラーゼ遺伝子を組み込んだミニゲノムを構築中である。
4、 T7プロモーター遺伝子を保持した発現ベクターにRC-HL株の全遺伝子をカッセト方式で組み込み中である。

Research Products

• [Publications] Luo,T.R.,: "Antigcnic and functional analyses of glycoprotein of rabies virus using monoclonal antibodies." Microbiology & Immunology. 42. 187-193 (1998)
• [Publications] 小田切 雪香: "狂犬病ウイルスの新たな病原制御遺伝子領域の検索" 第126回日本獣医学会(1998年8月)発表.
• [Publications] 伊藤 直人: "狂犬病ウイルス西ヶ原株とその継代株RC-HL株のゲノム全塩基配列の比較" 第126回日本獣医学会(1998年8月)発表.
• [Publications] Ito,N.,: "Molecular epidemiology of rabies in Thailand" Microbiology & Immunology. (発表予定).