1999 Fiscal Year Annual Research Report
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10557012
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
仲野 徹 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (00172370)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴山 史朗 小野薬品, 水無瀬総合研究所, 主任研究員
福島 大吉 小野薬品, 水無瀬総合研究所, 主任研究員
高橋 知巳 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (70283801)
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| Keywords | 造血幹細胞 / 発生 / 細胞分化 / 分泌タンパク / シグナル伝達 |
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| Research Abstract |
造血システムの初期発生に関与する因子をクローニングするために、OP9細胞によるマウスES細胞から造血細胞への分化誘導と、分泌タンパクをクローニングする方法であるシグナル-クエンストラップ法を組み合わせてクローニングを行った。分化誘導5日目の、中胚葉系細胞からヘマンジオブラストや造血細胞が出現する時点のmRNAを材料にライブラリーを作成し、スクリーニングを行った。その結果、ESOP-1と命名した160アミノ酸からなる蛋白のcDNAをクローニングした。このマウスESOP-1はヒトESOP-1とアミノ酸レベルで64%の相同性があった。受精後7.5日間のマウス胎仔でESOP-1のcDNAは強く発現しており、また、胚・成体の造血システムにおいても発現が認められた。抗体を用いた検討から、ESOP-1蛋白は、胎仔の卵黄襄、発生過程の神経系、成体の生殖器での発現が認められた。このパターンなどから、ESOP-1は造血システムの発生に関与するものと考えられた。
また、胚性幹細胞の分化誘導では、未分化な胚型 (卵黄襄型) 赤血球を産生することが可能である。この実験系を用いて、胚型の赤血球は、未分化な段階のみならず、ヘモグロビン化がおこった分化のかなり遅い段階においても、エリスロポエチンが生存に必須であることを明らかにした。エリスロポエチン欠損マウスとの比較との対比から、in vivo においては、エリスロポエチン以外にも赤血球産生を制御する液性因子が存在するものと推測された。
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[Publications] N. Motoyama,T. Kimura,T. Takahashi,T. Watanabe,T. Nakano: "bcl-x Prevents Apoptotic cell Death of Both Primitive and Definitive Erythrocytes at the End of Maturation"J Exp Med. 189. 1691-1698 (1999)
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[Publications] S. K. Cho,T. D. Webber,T. Nakano,S. M. Lewis,J-C. Zuniga-Pflucker: "Functional characterization of B lymphocytes generated in vitro from embryonic stem cells"Proc Natl Acad Sci USA. 96. 9797-9802 (1999)
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[Publications] T. Kimura, K. Yomogida,N. Iwai,Y. Kato,T. Nakano: "Molecular cloning and genomic organization of mouse homologue of Drosophila germ cell-less and its expression in germ lineage cells"Biochem Biophys Res Commun. 262. 223-230 (1999)
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[Publications] T. Era,T. Takahashi,Y. Takagi,T. Nakano: "Characterization of hematopoietic lineage specific gene expression by ES cell in vitro differentiation induction system"Blood. 95. 870-878 (2000)
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[Publications] T. Takahashi,N. Suwabe,P. Dai,M. Yamamoto,S. Ishii,T. Nakano: "Inhibitory interaction of c-Myb and GATA-1 via transcriptional co-activator CBP"Oncogene. 19. 134-140 (2000)
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[Publications] K. Kato,A. M. Morrison,T. Nakano,K. Tashiro, T. Honjo: "ESOP-1,a secreted protein expressed in the hematopoietic,nervous and reproductive systems of embryonic and adult mouse"Blood. (in press). (2000)
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[Publications] 仲野 徹: "岩波講座・現代医学の基礎8 : 免疫と血液の科学、第一章、血液細胞の発生と分化"岩波書店. 19 (1999)
