1999 Fiscal Year Annual Research Report
培養自己骨格筋芽細胞の移植による梗塞心筋組織の再生に関する実験的研究
Project/Area Number |
10557066
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Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
増田 善昭 千葉大学, 医学部, 教授 (00009490)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小宮山 政敏 千葉大学, 医学部, 助手 (70175339)
豊田 直二 千葉大学, 医学部, 講師 (00188822)
嶋田 裕 千葉大学, 医学部, 教授 (70009116)
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Keywords | 骨格筋細胞 / 心筋細胞 / 培養 / 移植 / 再生 / 筋蛋白質 |
Research Abstract |
骨格筋芽細胞を心筋の傷害部へ移植して骨格筋と心筋とのキメラ組織をつくり心機能の改善をはかることを視野におき、その基礎実験として骨格筋芽細胞と心筋細胞を混合培養したモデル系をつくり、両者の発育と分化について解析を行った。骨格筋芽細胞は11日齢のニワトリ胚の胸筋を、また心筋細胞は7日齢のニワトリ胚の心室筋を解離することにより得た。混合培養に適した条件を調べるために、まずはそれぞれ単独に培養液の組成を変えながら培養を行った。その結果、骨格筋用の培養液と心筋用の培養液を1対1の割合で混合した培養液を用いると、どちらの細胞も専用の培養液を用いた場合とほぼ同様に発育・分化することが明らかになった。さらにこの培養液を用いて両者を混合培養した場合も、それぞれを単独培養した場合と同様に発育することが分かった。骨格筋芽細胞と心筋細胞を1対1の割合で混合して培養を始めると、骨格筋細胞は培養初期に分裂増殖するのに対し心筋細胞はそれほど分裂しないため、しだいに骨格筋細胞が優位になってきた。そこで、骨格筋1に対し心筋3の割合で培養することにした。混合培養下においても、2日目以降になると骨格筋どうしが集まって多核の筋管を形成する傾向がみられたが、そのような筋管や単核の筋芽細胞と心筋細胞とが接触している像も観察された。しかしながら、それらの接触部位に心筋組織における介在板のような機能的な細胞間接着構造が形成されているかどうかは未だ確認していない。今後さらに骨格筋・心筋間の接触部位が増えるよう培養条件の最適化をはかるとともに、接触部位の構造について微細形態学的ならびに免疫組織化学的に解析を進める予定である。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Toyota, Naoji: "Assembly of force-expressed troponin-I isoforms in myofibrils of cultured cardiac and fast skeletal muscle cells as revealed by epitope tagging"J. Muscle Res. Cell Motil.. 19. 937-947 (1998)
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[Publications] Toyozaki, Tetsuya: "Levels of soluble Fas in patients with myocarditis, heart failure of unknown origin, and in healthy volunteers"Am. J. Cardiol.. 81. 798-800 (1998)
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[Publications] Soeno, Y.: "BDM(2,3-Butanedione monoximide), an inhibitor for myosin-actin interaction, supress myofibrillogenesis in skeletal muscle cells in culture"Cell Tissue Res.. 295. 307-331 (1999)
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[Publications] Ehler, Elisabeth: "Myofibrillogenesis in the developing chicken heart: assembly of Z-disk, M-line and the thick filaments"J. Cell Sci.. 112. 1529-1539 (1999)
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[Publications] Nwe, Tin Moe: "Relation of nebulin and connectin (titin) to dynamics of actin in nascent myofibrils of cultured skeletal muscle cells"Exp. Cell Res.. 252. 33-40 (1999)
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[Publications] Toyota, Naoji: "Thin filament binding domains of cardiac and fast skeletal muscle troponin I isoforms as studied by epitope tagging"J. Muscle Res. Cell Motil. 20. 755-760 (1999)
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[Publications] Shimada, Yutaka: "Myofibrillogenesis"Birkhauser (in press).