1998 Fiscal Year Annual Research Report
高感度、高分解能MS/MS/MS分析用高エネルギー衝突活性化開裂装置の開発
Project/Area Number |
10558099
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
高尾 敏文 大阪大学, 蛋白質研究所, 助教授 (10197048)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田村 淳 日本電子(株)技術本部MS研究開発部, 研究員
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Keywords | 磁場型質量分析 / 生体分子 / コリジョンセル / イオン透過率 / 高エネルギー衝突活性化開裂 / プロダクトイオン / 構造解析 |
Research Abstract |
質量分析において高エネルギー衝突活性化開裂による生体分子の構造解析を効率よく行う方法を立するために、新たに衝突活性化開裂室(コリジョンセル)の設計、試作を行った。この際、高いイオン透過率と効率よい衝突活性化開裂を実現するにあたり、高電圧印加型コリジョンセル(耐圧10kV)とセル内で生成したプロダクトイオンを再加速するための加速レンズ(左右2枚からなる)を試作した。また、それらを組み込んだイオン源ブロックは、従来のものと互換性があるように計、試作した。合わせて、高電圧供給用密封端子、最大5kVまで印加可能な低リップル高圧電源、電場一磁場同時掃引用制御基盤を製作した。試作装置を既設の磁場型質量分析計に組み込み、0-5kVの範囲でコリジョンセルと加速レンズ(コリジョンセル電圧の50-90%)に電圧をかけ、標準試料を用いてイオン透過率について検討した。その結果、10kVで加速したイオンに対してコリジョンセル電圧3kVという条件で、プロダクトイオンのエネルギー損失、イオン透過率という点で最もよい結果が得られた。現在、この条件のもとで、実用質量範囲であるm/z100-3000において、既知ペプチド、糖、脂質などの生体分子の測定を行い、得られる構造情報と測定感度についてデーターを収集し、試作装置の評価と仕様を作成している。また、多価イオン(エレクトロスプレーイオン化法により生成)をプリカーサーとして測定した場合についても同様に検討を進めている。
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[Publications] Takao,T.et al.: "Accurate Peptide Sequencing by Mass Spectrometry." "Peptide Sciences Present and Future",ed.Y.Shimonishi,Kluwer Academic Publishers. 150-155 (1998)
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[Publications] Daquinag,A.et al.: "A Novel Endogeneous Inhibitor or Phenoloxidase from Musca domestic Has a Cystine Motif Commonly Found in Shail and Spider Toxins" Biochemistry. (in press). (1999)
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[Publications] Betancourt,L.et al.: "Structural Characterization of Acetobacter Diazotropicus Levansucrase by Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry:Identification of an N-Terminal Blocking Group and a Free-thiol Cysteine" J.Mass Spectrom.(in press). (1999)
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[Publications] F-Cossio,J.et al: "Automated Interpretation of High-Energy Collision-Induced Dissociation Spectra of Singly-Protonated Peptides by "SeqMS",a Software Aid for De Novo Sequencing by MS/MS" Rapid Commun.Mass Spectrom.12. 1867-1878 (1998)
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[Publications] Matsuda,T.et al.: "Specific Isoprenyl Group Linked to Transducin gamma-Subunit is a Determinant of Its Unique Signaling Properties among G-Proteins" Biochemistry. 37. 9843-9850 (1998)
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[Publications] Mo,W.et al.: "Structural Analysis of Oligosaccharides Derivatized with 4-Aminobenzoic Acid 2-(Diethylamino)ethlyl Ester by Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry" Anal.Chem.70. 4520-4526 (1998)
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[Publications] 高尾敏文: "質量分析による分子量の精密測定 植物のタンパク質実験プロトコール細胞工学別冊、植物細胞工学シリーズ9" 秀潤社, 8 (1998)