1999 Fiscal Year Annual Research Report
高感度、高分解能 MS/MS/MS 分析用高エネルギー衝突活性化開裂装置の開発
Project/Area Number |
10558099
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
高尾 俊文 大阪大学, 蛋白質研究所, 助教授 (10197048)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田村 淳 日本電子株式会社, 技術本部・MS研究開発部, 研究員
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Keywords | 磁場型質量分析計 / 高エネルギー衝突活性化開裂 / 生体分子 / コリジョンセル / イオン透過率 / プロダクトイオン / 構造解析 |
Research Abstract |
質量分析において高エネルギー衝突活性化解裂による生体分子の構造解析を効率よく行う方法を確立するために、平成10年度設計、試作の衝突活性化開裂室(コリジョンセル)を既設の磁場型質量分析計に組み込んで種々のペプチドの測定を行なった。(予想通り、高エネルギー衝突活性化開裂により特徴的なフラグメンーションが観測された。)イオン透過率の点から、高速原子衝撃イオン化法により生成した一価イオンに対しては、初期加速電圧10kV、コリジョンセル電圧3kV、二次加速電圧1.5kVという条件、また、エレクトロスプレーイオン化法により生成した二価イオンに対しては、初期加速電圧7kV、コリジョンセル電圧1.5kV、二次加速電圧0.7kVという条件で最も良好な結果が得られた。特に当初目的の前駆イオン質量の20%未満の低質量域でのイオン利得率が大幅に向上したこと、また全域にわたって質量分解能がコリジョンセル未装着の場合と比較して2-3倍改善した。これにより、磁場型質量分析計を用いたMS/MS/MSの最大の問題であった低質量域におけるプロダクトイオンからのMS/MS/MSが実現可能となり、また、全質量域にわたって分解能が向上し、精度の高い測定が行えるようになるものと考えられる。今後、既設の磁場型タンデム質量装置に本試作装置を移植し、生体分子のMS/MS/MSによる構造解析に応用していく予定である。
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[Publications] Fang,S. et al.: "Novel Rearranged Ions Observed for Protonated Peptides via Metastable Decomposition in Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry"J. Am. Soc. Mass Spectrom.. (印刷中). (2000)
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[Publications] Masuda,M. et al.: "Activation of Rho through a Cross-link with Polyamines Catalyzed by Bordetella Dermonecrotizing Toxin"EMBO J.. 19. 521-530 (2000)
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[Publications] Tsuda,M. et al.: "Keramamides M and N,Two New Cyclic Peptides with a Sulfate Ester from Theonella Sponge"Tetrahedron. 55. 12543-12548 (1999)
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[Publications] Mo,W. et al.: "Structural Characterization of Chemically Derivatized Oligosaccharides by Nanoflow Electrospray Ionization Mass Spectrometry"Anal. Chem.. 71. 4100-4106 (1999)
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[Publications] Betancourt,L. et al.: "Metastable Decomposition of a Peptide Containing an Oxidized Methionine(s) in Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry"Rapid Commun. Mass Spectrom.. 13. 1075-1076 (1999)
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[Publications] Betancourt,L. et al.: "Structural Characterization of A. Diazotropicus Levansucrase by MALDI-MS : Identification of an N-Terminal Blocking Group and a Free-thiol Cys Residue"J. Mass Spectrom.. 34. 169-174 (1999)
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[Publications] 高尾俊文: "蛋白質・核酸・酵素 蛋白質の質量分析(1) 磁場型質量分析装置とその応用"共立出版 (印刷中). (2000)