1999 Fiscal Year Annual Research Report
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10660030
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| Research Institution | Kochi University |
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Principal Investigator |
北島 宣 高知大学, 農学部, 助教授 (70135549)
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| Keywords | カンキツ / 染色体 / 核型 / CMA染色 / GISH |
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| Research Abstract |
カンキツの染色体地図作成には、染色体の識別に基づく染色体構成を明らかにする必要がある。昨年度にはCMA染色は染色体の識別に有効なことを認め、5種類のカンキツでCMA染色に基づく染色体構成を明らかにした。しかし、同一のCMAバンドパターンをもつ染色体間の識別は困難である。そこで、これらの識別に有効なGISH(Genomic in situ Hybridization)法を検討した。
'南柑20号'ウンシュウミカン、'土佐文旦'、'ワシントンネーブル'オレンジ、ブッシュカンの葉からDNAを抽出し、ニックトランスレーション法によりビオチン(Bio)またはディゴキシゲニン(Dig)標識した。Bio標識した'土佐文旦'DNAプローブ(以下、Bio'土佐文旦')10μlを単用で'南柑20号'染色体標本にハイブリダイズすると、シグナルはほぼ同様であり、染色体の形態も不明瞭であった。Bio'南柑20号'10μl+Dig'土佐文旦'5、2.5、1μlおよびBio'土佐文旦'10μl+Dig'南柑20号'5、2.5、1μlの組み合わせでは、Bio'南柑20号'10μl+Dig'土佐文旦'1μlで色調の異なる特異的なシグナルが検出されたが、染色体の形態は不明瞭であった。Bio'土佐文旦'10μl+Dig'南柑20号'5μlでは色調の強い特異的なシグナルが検出され、染色体の形態は明瞭であり、染色体の識別に有効であった。Bioブッシュカン10μl+Dig'南柑20号'5μl、Bio'ワシントンネーブル'10μl+Dig'南柑20号'5μlおよびBioブッシュカン10μl+Dig'土佐文旦'5μlについて検討すると特異的なシグナルは検出されるが、染色体の識別にはやや劣った。Bio'土佐文旦'10μl+Dig'南柑20号'5μlでは、CMA染色による'南柑20号'ウンシュウミカンの8本のD型染色体は、シグナルの色調と大きさから黄大、黄小、橙大、橙小、赤小の5グループに分類することができ、GISH法の有効性が認められた。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] Befu,M.,A.Kitajima and K.Hasegawa: "Classification of 'Tosa-Buntan' pummelo (Ctrus grandis [L.]Osb.),'Washington' Navel orange (C.sinensis [L.] Osb) and trifoliaFe orange (Poucirus tnfoliata[L.] Raf.) chroiuosoiues."J.Japan.Soc.Hort.Sci.. 69・1. 22-28 (2000)
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[Publications] 北島宣、別府まゆみ、日高佳子、長谷川耕二郎: "カンキツ染色体標本作製における酵素処理条件とウンシュウミカンおよびブンタン染色体の識別"園芸学会中四国支部要旨. 38. 16 (1999)
