1999 Fiscal Year Annual Research Report
魚類細胞外マトリックス成分の細胞結合ドメインの構造と機能
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10660202
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
内田 直行 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (80151885)
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| Keywords | ティラピア / コイ / ウシ / 血漿フィブロネクチン / 細胞結合ドメイン / ナマズ / ウナギ / 肝細胞 |
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| Research Abstract |
ティラピア肝細胞(THC)が結合できないコイpFN(CpFN-I),結合できるティラピアpFN(TpFN-I),ナマズ肝細胞(CHC)が結合できないウシpFN(BpFN)のプロテアーゼ分解により得たフラグメント(Fg)をゲルろ過により分離し,両HCと特異性の低いウナギ肝細胞(EHC)に対する結合性を比較した結果,
1.CpFN-IのプロナーゼFgから、EHC及びTHCそれぞれに優先的に結合するFgを分離した。2.CpFN-IのサーモリシンFgからEHCのみに結合するFgを分離し,これをさらにプロナーゼにより分解したところTHCに対する結合性を発現した。このサーモリシンFgのプロナーゼ分解物から両HCそれぞれに優先的に結合するFg及び両HCに結合するFgを分離した。また,両HCのそれぞれに優先的に結合するFgと両HCの結合はRGDSペプチドによりほぼ完全に阻害された。3.TpFN-IのサーモリシンFgから両HCそれぞれに優先的に結合するFg及び両HCに結合するFgを分離した。
これらの結果から,EHC及びTHCは両pFN上のRGD配列を中心とする異なる結合部位を認識し,CpFN-Iに対するTHCの結合不全はCpFN-I上のTHC結合部位がマスクされているためと考えられた。
4.BpFNをスブチリシン分解し,さらにペプシン分解したFgからEHC及びCHCそれぞれに優先的に結合するFgを分離した。5.BpFNのサーモリシンFgからEHCのみに結合するFgを分離し,これをさらにスブチリシンおよびペプシン分解したところCHCに対する結合性を発現した。
これらの結果から,EHC及びCHCはBpFN上の異なる結合部位を認識し,BpFNに対するCHCの結合不全はBpFN上のCHC結合部位がマスクされているためと考えられた。
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Research Products
(1 results)
