下垂体前葉細胞の増殖調節に関する細胞内情報伝達経路の解析

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10670060
• Research Institution: 山梨医科大学
• Principal Investigator: 有田 順 山梨医科大学, 医学部, 教授 (80128587)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山川 耕司 山梨医科大学, 医学部, 助手 (90293472)
• Keywords: 下垂体前葉 / 増殖 / サククリックAMP / MAPキナーゼ

Research Abstract

プロラクチン(PRL)細胞の増殖を調節するcAMP/protein kinase Aとインスリン/MAP kinaseの二つの情報伝達系の相互作用を調べた。
【研究結果】
1. MAP kinase cascadeを介してPRL細胞増殖を促進する成長因子であるインスリンの作用を十分に抑制するPD98059の濃度を決定した。5μMのPD98059はインスリン200ng/mlによるPRL細胞の増殖を有意に抑制し、10-50μMの範囲で最大の増殖抑制効果が認められたので、今後50μMの濃度を使用することにした。
2. PD98059を使ってPRL細胞の基礎増殖率に対する効果を調べるとともに、細胞内cyclic AMP濃度を増加させるforskolinの最大増殖刺激効果がPD98059によって抑制されるかを調べた。PD98059は基礎増殖率に対しては全く影響を与えなかったが、インスリン200ng/mlによるPRL細胞の増殖をほぼ完全に抑制した。また、PD98059は1μMのforskolinによる増殖を約60%抑制した。
3. 成長因子の作用発現にcyclic AMP/protein kinase Aが関与している可能性も考えられたので、forskolinの作用を十分に抑制するH89、KT5720の濃度によってインスリンの増殖促進が抑制されるかを調べた。1μMのforskolinの増殖促進効果を、H89およびKT5720はそれぞれ1および0.5μMの濃度で抑制した。これらの濃度では、基礎増殖率は影響を受けなかったが、H89は5000ng/mlのインスリンによる増殖を56%、KT5720は58%抑制した。

Research Products

• [Publications] S.Suzuki: "Mitogen-activated protein kinase-dependent stimulation of proliferation of rat lactotrophs in culture by cyclic AMP" Endocrinology. in press. (1999)
• [Publications] J.Arita: "Modulation of proliferation of rat lactotrophs in culture by protein kinase A and C" The Japanese Journal of Physiology. 48.suppl.202 (1998)
• [Publications] 鈴木伸一: "培養ラットプロラクチン産生細胞におけるmitogen-activated protein(MAP)kinase依存性のcyclic AMP増殖促進効果" 日本内分泌学会雑誌. 74巻・1号. 111 (1998)