ヒト脳腫瘍におけるp16遺伝子およびその発現異常の研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10670185
• Research Institution: Chiba Cancer Center (Research Institute)
• Principal Investigator: 望月 重信 千葉県がんセンター, 研究局・病理研究部, 主任研究員 (60260246)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩立 康男 千葉大学, 医学部・脳神経外科, 助手 (70272309)
• Keywords: ヒト脳腫瘍 / p16遺伝子異常 / ホモ接合型欠失 / 突然変異 / 発現異常

Research Abstract

日本人脳腫瘍患者由来DNA63例(上衣腫1例、乏突起膠腫6例、星細胞腫10例、退形成性星細胞腫10例、髄芽腫1例、膠芽腫35例)を用い、9番染色体短腕に存在するがん抑制遺伝子候補であるp16遺伝子の異常を検索した。まずp16遺伝子のホモ接合型欠失の有無を、pl6遺伝子エクソン2および同じ9番染色体長腕に存在する9qSTS5を増幅する2種のプライマー系を用いたマルチプレックスPCR法により調べた。様々の割合でpl6遺伝子欠失DNAと正常組織由来DNAを混合したマルチプレックスPCR産物のバンド濃度を定量化し得られた標準曲線より、20%の正常組織DNA混入時の値以下を示した検体をp16遺伝子ホモ接合型欠失とした。pl6遺伝子ホモ接合型欠失は1例の退形成性星細胞腫と6例の膠芽腫においてのみ認められた。PCR-SSCP法によるpl6遺伝子変異のスクリーニングでは星細胞腫の1例、退形成性星細胞腫の1例および膠芽腫の6例で移動度の異なるシグナルがみられた。この8症例のPCR産物をベクターに組み込み塩基配列を決定した。全例に突然変異が検出され、膠芽腫の3例のコドン66、143、145にアミノ酸置換の予測される変異がみられた。抗pl6抗体を用いた免疫染色法によりpl6蛋白発現を検索した46症例(上衣腫1例、乏突起膠腫4例、星細胞腫5例、退形成性星細胞腫6例、膠芽腫29例)中70%以上の腫瘍細胞が反応陰性であった例は星細胞腫の1例、退形成性星細胞腫の2例、および膠芽腫の6例であり、その他の例でも反応陰性細胞のクローナルな増殖がしばしば認められた。また上衣腫の1例、膠芽腫の3例では部位による差が大きく、70%以上の腫瘍細胞が陽性の部位と陰性の部位が認められた。これらの所見はpl6遺伝子の異常およびその発現異常は脳腫瘍の悪性化の段階に働いていることを示唆する。

Research Products

• [Publications] 望月 重信ら: "脳腫瘍におけるp16遺伝子およびPTEN遺伝子の異常" 日本癌学会総会記事. 57. 422 (1998)
• [Publications] 岩立 康男ら: "Astrocytic tumorにおけるPTENおよびp16遺伝子異常と抗癌剤感受性との相関" 日本癌学会総会記事. 57. 139 (1998)
• [Publications] 岩立 康男ら: "Astrocytic tumorにおける癌抑制遺伝子異常と抗癌剤感受性" 日本脳神経外科学会総会抄録集. 57. 230 (1998)
• [Publications] 岩立 康男ら: "Astrocytic tumorにおけるp53,p16,PTEN遺伝子異常と予後" 第7回日本癌腫瘍カンファランス抄録集. 7. 96 (1998)