1999 Fiscal Year Annual Research Report
陽性荷電蛋白の腎尿細管基底膜への結合による過敏性間質性腎炎モデルの作製と解析
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10670217
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Research Institution | Jikei University School of Medicine |
Principal Investigator |
城 謙輔 東京慈恵会医科大学, 病理学講座第2, 助教授 (10057086)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
金綱 友木子 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (40231261)
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Keywords | マウス尿細管上皮 / 培養 / MHC class II / ICAM-1 / INFγ / IL-1β / TNFα / Tリンパ球 |
Research Abstract |
3週雄Balb/cマウスの尿細管上皮(TEC)を無血清培地にて初代培養し、下記のサイトカインを投与した。48時間後、単離細胞とし、R-PhycoerythrinラベルMHCclassI(H-2D^d),MHCclassII(I-A^d/I-E^d),ICAM-1,B7-1(CD80),B7-2(CD86)抗体にて染色後、FACScanにて解析した。投与したサイトカインとしては、interferon(INF)-γ(100U-ml)、そして同種のマウス腹腔より採取したマクロファージ(mφ)を10ng/mlのLPSにより刺激し、4時間、24時間、72時間の上清を回収して、mφ由来のサイトカインとした。また、リコンビナントのIL-1β(250pg/ml)とTNFα(10ng/ml)を同様に投与した。INF-γにより刺激されたTECは、MHCclassI,MHCclassII,ICAM-1の発現を増したが、B7-1,B7-2は発現しなかった。mφ由来のサイトカインとして、LPS刺激後4時間、24時間、72時間にて、それぞれTNFαは5338pg/ml,2035pg/ml,567pg/ml、IL-1βは29pg/ml,83pg/ml80pg/ml検出された。それらのサイトカインによりTECに形質転換はなかった。リコンビナントIL-1βとTNFαによっても同様の結果であった。以上、TECのMHCclassII,ICAM-1の発現には、mφ由来のサイトカインではなく、活性化Tリンパ球由来のINF-γが関与した。さらに、INF-γによりMHCclassIIを発現した尿細管上皮細胞がスーパー抗原とともにT細胞を活性化するかどうかを調べた。尿細管上皮細胞の培養シャーレに、(1)培地のみ(2)黄色ブドウ球菌の外毒素であるTSST-1(3)T細胞のみ(4)TSST-1+T細胞、をそれぞれ添加した。(4)の条件においてIFN-γの処理の有無に関わらず、T細胞の増殖反応がみられた。また尿細管上皮細胞を予めIFN-γで処理した場合、[^3H]-チミジンの取りこみは、無処理時の約2倍の値を示した。以上、尿細管上皮に発現したMHCclassII分子はスーパー抗原と共にTリンパ球を活性化した。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Joh,K: "Cationic antigen : a possible role in the pathogenesis of allergic tubulointerstitial nephriytis"Jikeikai Med J. 46. 55-68 (1999)
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[Publications] Ando M et al.: "A novel 18-amino acid deletion in apolipoprotein E associated with lipoprotein glomerulopathy"Kidney Int. 56. 1317-1323 (1999)
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[Publications] Morioka T et al.: "Nucleosome core particles and DNA bind to the human glomerular basement membrane : role of the amyloid P component of the GBM"Clin Exp Nephral. (印刷中). (2000)
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[Publications] Mochizuki H et al.: "Focal segmental glomerulosclerosis in apatient with Prader-Will syndrome : Case report"Clin Nephral. (印刷中). (2000)
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[Publications] Saeki T et al.: "Primary solitary paraganglioma of the lung : A case report and a review of literature"Surg Today. 25. 1195-2000 (1999)
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[Publications] 阿部 文 他: "急性活動性糸球体病変を伴ったImmunotactoid Glomerulopathyの1例"日本内科学雑誌. 88. 143-145 (1999)
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[Publications] 城 謙輔: "病理と臨床 免疫組織化学とin situ hybridizationのすべて。"文光堂. (2000)