スカペンジャー受容体に対する非ウイルス遺伝子導入法を用いた動脈硬化治療法の研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10670221
• Research Institution: Fukuoka University
• Principal Investigator: 自見 至郎 福岡大学, 医学部, 助手 (30226360)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 竹林 茂夫 琉球大学, 医学部, 教授 (80078740) ; 太田 孝男 琉球大学, 医学部, 教授 (70185271) ; 朔 啓二郎 福岡大学, 医学部, 講師 (40183371)
• Keywords: アンチセンス / 遺伝子発現 / スカペンジャー受容体SR-BI / 非ウイルス遺伝子治療 / LDL-受容体

Research Abstract

私達は非ウイルス遺伝子治療法のベクターとして、合成ペプチドdiC_<18>-Gly-apoEを聞允した。LDL-受容体と結合するアポ蛋白Eの129-169のペプチド合成物のN末端をパルミチック酸でアシル化し、さらにグリシンでアルキル化し、よりコンデンスさせLDL受容体に結合しやすくした。この新ベクターにスカベンジャー受容体SR-Bl遺伝子アンチセンスを結合させ、その発現を抑制できるかを観察した。今回私達は、diC_<18>-Gly-apoEペプチドによるgene delivering systemを用いることにより、より臓器特異的にLDL受容体を介し、スカベンジャー受容体SR-BIアンチセンスを培養細胞核内に有効に導入できた。第一段階のデータとしてFITC標識スカベンジャー受容体SR-BIを効果的に実験細胞の核内に導入したことを認めた。現在同様の方法を用い、培養肝細胞、肝組織とのincubation実験、実験動物生体内での肝灌流実験に移行し、アンチセンス療法の特異性を生体内でも維持できるかを確かめている。

Research Products

• [Publications] Ou J.Saku K.,Jiml S.,Ohla T.,Zhang B.,Pownall HJ.,Tsujita Y.,Arakawa K.: "Nechamism of action of probucol oh cholesterol ester transfer proteln (CETP) mRNA in a Chlnese Hamster Ovary cell line that had been stably transfected with a human CETP gene." Blochimica et Blophysica Acta. 1393. 153-160 (1998)
• [Publications] Saku K.,von Eckardstein A.,Zhang B.,Iju R.,Jimi S.,Ou J.,Ohata T.,Assmann G.,Arakawa K.: "In vlvo kinetics of human apollpoprotein A-1 variants in rabbits." Eur.J.Clin.Invest.(in oress). (1999)
• [Publications] Jimi S.,Cesugi N.,Saku K.Itabe H.,Zhang B.,Arakawa K.Takebayashi S.: "Possible induction of renal dysfunction in patlents with leclthin:cholesterol acyltransferase deficlency by oxidized phosphatidvlcholine in glomerull." Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vasular Biology. (in press). (1999)
• [Publications] Ou JF.,Saku K .Jimi S.,Iju K.xin DP.Sparrow JT.Zhang B.,Pownalf IU.,Smith I.C...Arakawa K.: "Efficient nuclear dellvery of antlsense ollgodeoxynucleotldes and selective inhlbition of CETP expression by apollpoprotein E peptide in a human CETP stably transfected CHO cell line." Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vasular Biology. (in press). (1999)
• [Publications] Jimi S.,Saku K.,Kusaba H.Habe H.Koga N.Takebayashi S.: "Deposition of oxidized low-density lipoprotein and collagensis occur coincidentally in human coronary stenosis: an Immunohistochemical stidy of atherectomy" Coronary Artery Disease. 9. 551-557 (1998)
• [Publications] Habe H.,Jimi S.,Kamimasa S.,Suzuki K.,Uesugi N.,Imaneka T.,Shija H.,Takano T.: "Appearance of cross linked proteins in human atheroma and rat pre-fibrotic liver detected by a new monoclonal antibody" Biochimica et Biophysica Acta. 1406. 28-39 (1998)