1999 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子銃による細胞内寄生菌に対する指向性DNAワクチンの研究
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10670252
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| Research Institution | HAMAMATU UNIVERSITY SCHOOL OF MEDECINE |
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Principal Investigator |
小出 幸夫 浜松医科大学, 医学部, 教授 (30126809)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 篤司 浜松医科大学, 医学部, 助手 (10242778)
永田 年 浜松医科大学, 医学部, 助教授 (90275024)
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| Keywords | DNAワクチン / 細胞傷害性T細胞 / Th1細胞 / 細胞内寄生菌 / 感染防御 / 遺伝子銃 |
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| Research Abstract |
Listeria monocytogenesを細胞内寄生菌のモデルとし,この菌に対する感染防御に重要な細胞性免疫反応,すなわち細胞傷害性T細胞(CTL)と1型ヘルパーT(Th1)細胞を任意に感作できるDNAワクチンの開発を行った。これにより,感染防御に必要な細胞性免疫反応のみを誘導できる指向性DNAワクチンを作製できる。このDNAワクチンの接種には遺伝子銃を用いた。これにより,少量のDNAで再現性良く,CTLおよびTh1細胞が誘導できた。
[CTL誘導型DNAワクチン]1)MHCクラスI拘束性の3種のCTLエピトープ,すなわちLLO 91-99,60 217-225,60 449-457,を用いてCTL誘導型DNAワクチンを作製した。これらのCTL誘導能には差があり,LLO 91-99>60 217-225>60 449-457の順であった。
2)これらはTh細胞非依存性にCTLを誘導できることが分かった。3)これらはリステリア感染に対する防御能をマウスに賦与した。その防御能はCTL活性と比例した。4)誘導されたCTLはIFNーγを産生したが,これは感染防御に関与しなかった。
[Th誘導型DNAワクチン]1)MHCクラスII拘束性のThエピト-プ,LLO 215-226,p60 301-312,を用いてTh誘導型DNAワクチンを作製した。しかし,Th細胞を誘導させるためには,エピトープをIi鎖のCLIP領域と置換させ,エピトープを強制的にクラスII分子に結合させることが必要であった。2)これらのワクチンは抗原特異的な増殖反応を示した。3)これらのワクチンの感染防御能は,CTL誘導型ワクチンに比して弱かった。4)有効な感染防御免疫を賦与できるワクチンを作製するため,IL-12,CpGモチーフを組み合わせたワクチン投与法を検討中である。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Yoshida,Y,,et al: "Advantage of gene gun-mediated over intramuscular inoculation of plasmid DNA vaccine in reproducible induction of specific immune responses"Vaccine. (印刷中).
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[Publications] Nagata,T,,et al: "Codon optimization effect on translational efficiency of DNA vaccine in mammalian cells : analysis of plasmid DNA encoding a CTL eptope derived from microorganisms"Biochem.Biophys.Res.Commun,. 261. 445-451 (1999)
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[Publications] Uchijima,M.,et al: "Optimization of codon usage of plasmid DNA vaccine is required for the effective MHC class I-restricted T cell responses against an intracellular bacterium"Journal of Immunology. 161. 5594-5599 (1998)
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[Publications] Ide,K.,et al: "Decreased expression of Th2 type cytokine mRNA contributes to the lack of allergic bronchial inflammation in aged rats"Journal of Immunology. 163. 396-402 (1999)
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[Publications] Koide,Y.,et al: "DNA vaccines for infections with intracellular bacteria"Current Trends in Immunology. 1. 123-132 (1998)
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[Publications] Kageyama,Y.,et al: "Reduced susceptibility to collagen-induced arthritis in mice deficient in interfeton-gamma receptor"Journal of Immunology. 161. 1542-1548 (1998)
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[Publications] 小出幸夫: "細胞内寄生菌感染に対するDNA(遺伝)ワクチン"日本細菌学雑誌. 54(4). 773-793 (1999)
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[Publications] 小出 幸夫(分担): "Annual Review免疫 1999"中外医学社. 329 (1998)
