抗酸菌で誘導される免疫抑制性マクロファージのサプレッサー機能の発現メカニズム

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10670255
• Research Institution: Shimane Medical University
• Principal Investigator: 冨岡 治明 島根医科大学, 医学部, 教授 (40034045)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐藤 勝昌 島根医科大学, 医学部, 助手 (00142331) ; 清水 利朗 島根医科大学, 医学部, 助手 (60284030)
• Keywords: 抗酸菌 / M.avium complex / サプレッサーMΦ / B_<7-1> / CD28 / CTLA-4 / adhesion molecule / サイトカイン

Research Abstract

申請者のこれまでの検討で,(1)抗酸菌[M.avium complex(MAC)]感染症では,サプレッサーMΦが感染2〜4週後にTNF-aやIFN-γなどの働きを介して誘導される,(2)このサプレッサーMΦはPKCとCa^<2+>イオノフォアで誘導されるT細胞の活性化を抑制する,(3)サプレッサーMΦはRNIや脂肪酸などをエフェクターとしているが,その作用発現には標的細胞への結合が必要であり,その際にはMΦ側のB_<7-1>分子が重要な役割を演じている,ことなどが明らかになっている.本年度の抗CD28,抗CTI,A-4抗体,CTLA-4 Igを用いての詳細な検討により,サプレッサーMΦのB_<7-1>分子に対する標的T細胞の側のレセプターはCD28やCTLA-4以外の分子であることが確かめられた.さらにELISA法を用いての実験で抗酸菌感染誘導サプレッサーMφではB_<7-1>分子の発現増強がみられること,ならびにサプレッサーMΦの標的T細胞への結合は実際に抗B_<7-1>抗体処理でブロックされることが証明された.また,サプレッサーMΦの活性発現には内因性のTNF-aのみならず標的T細胞により産生されるIFN-γも重要な役割を演じており,MφをCaM kinase II阻害剤で処理した場合にはサプレッサー活性発現は部分的に阻害されるが,これらの現象との関連でMAC感染MΦでの諸種サイトカイン(CK)発現動態についてみたところ,感染早期での炎症性CK(TNF-a,IL-Iα,IL-12)のみならず抗炎症性CK(IL-10,TGF-β)のmRNA発現の誘導が認められたが,その後の検討で内因性IL-10,TGF-βによるMAC菌殺菌能などのMφ細胞機能のdown-regulationは有意なものではないことが示され,これら抗炎症性CKのサプレッサーMΦの機能発現への関わりはTGF-βの標的T細胞への直接の作用を除いては否定的であることが分かった.現在,B_<7-1>遺伝子を組み込んだベクター系を用いての大腸菌でのB_<7-1>分子の発現実験が進行中であり,大量精製したB_<7-1>蛋白を用いての標的T細上のCD28,CTLA-4以外のB_<7-1>結合蛋白の検索を進めつつある.

Research Products

• [Publications] Sato Katumasa: "Differential potentiation of anti-mycobacterial activity and reactive nitrogen intermediate-producing ability of murin peritoneal macrophages activated by interferon-gamma and tumor necrosis facter-alpa." Clinical Experimental Immunology. 112. 63-68 (1998)
• [Publications] Sano Chiaki: "The modulating effects of proinflammatory cytokines interferon-gamma (IFN-γ) and tumour necrosis factor-alpha (TNF-α), and immunoregulating cytokines IL-10 and transforming growth factor-beta (TGF-β), on anti-microbial activity of murine peritoneal macrophages against Mycobacterium avium-intracellulare complex." Clinical Experimental Immunology. (1999)
• [Publications] Shimizu Tosiaki: "Roles of tumor necrosis facter-α transforming growth factor-beta in regulating intercellular adehesion molecule-1 expression on murin peritoneal macrophages infected with Mycobacterium leprae." Intenationl Journal of Leprosy. (1999)
• [Publications] Sano Chiaki: "Therapeutic effects of benzoxazinorifamycin KRM-1648 administered alone or in combination with a half-sized secretory leukocyte protease inhibitor or the nonsteroidal anti-inflammatory drug diclofenac.sodium against Mycobacterium avium complex infection in mice" Antimicrobial Agents & Chemotherapy. 43. 360-364 (1999)
• [Publications] Shimizu Tosiaki: "Effects of Chinese traditional medicine Mao-Bushi-saishin-To on therapeutic efficacy of a new benzoxazinorifamycin,KRM-1648,against Mycobacterium avium infection in mice." Antimicrobial Agents & Chemotherapy. (1999)
• [Publications] Sato Katumasa: "Antimicrobial activities of benzoxazinorifamycin (KRM-1648) and clarithromycin against Mycobacterium avium-intracellulare complex residing in murine peritoneal macrophages,human macrophage-like cells and human alveolar epithelial cells." Journal of Antimicrobial Chemotherapy. (1999)
• [Publications] 冨岡 治明: "微生物学 免疫学 (6.抗酸菌, 7.放線菌とノカルジア)" 医学教育出版社, 129-143 (1998)