1998 Fiscal Year Annual Research Report
セパシア菌病原因子の分泌機構と遺伝子発現調節機構の解析
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10670259
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
阿部 光子 山口大学, 医学部, 助手 (60107737)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中澤 晶子 山口大学, 医学部, 教授 (40053053)
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| Keywords | Burkholderia cepacia / セパシア菌 / disulfide oxidoreductase / プロテアーゼ / 溶血物質 / DsbA / 発現調節タンパク / Type II分泌機構 |
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| Research Abstract |
Burkholderia cepaciaのプロテアーゼとセパリシンの産生機構を明らかにするためTn5挿入変異法で取得したB.cepacia KF1株およびJN106株のプロテアーゼまたはセパリシン非産生変異株を解析し以下の結果を得た。
1。 KF1株由来のプロテアーゼ非産生、リパーゼ産生変異株を解析した結果、塩基配列から推測された212個のポリペプチドはEscherichia coliのペリプラスムタンパク、disulfide bond oxidoreductase(DsbA)と相同性を示した。
DsbAは内膜タンパクDsbBと共役して標的タンパクの分子内S-S bond形成を行う。本菌のDsbBについては既にプロテアーゼの成熟化に関与することを明らかにしており、B.cepaciaにおけるDsbA-DsbB系の存在が示めされた。
2。 KF1株由来のプロテアーゼおよびリパーゼ非産生変異株を解析した結果、グラム陰性菌のタンパク分泌系であるTypeII general secretion machineryの一部をコードするgspD,-E,-F,-G,-H,-I,-J,-K,-Lを同定した。通常のgsp遺伝子群は1つのオペロンで構成されているがB.cepacia gsp遺伝子群はgspG下流にxylEを連結しKF1株中でXylE活性を測定したところプロテアーゼの産生と共に活性は増大し、少なくとも2つの転写単位が存在することが示めされた。
以上よりプロテアーゼはペリプラスム中でDsbA-DsbB系により分子内S-S bondが形成され、リパーゼと共にTypeII分泌系を経由して分泌されることを明らかにした。
3。 JN106株由来のセパリシンおよびプロテアーゼ非産生変異株を解析した結果、アミノ酸残基327個、N末にhelix-turn-helix構造を持ちLysR familyに属する調節タンパクが同定され、コードする遺伝子をcviR(B.cepacia virulenceregulator)と命名した。
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