1998 Fiscal Year Annual Research Report
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10670297
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
高浜 洋介 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (20183858)
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| Keywords | Tリンパ球分化 / プレTCR / pTα鎖 / 細胞分化 / 胸腺 / 単クローン性抗体 |
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| Research Abstract |
Tリンパ球抗原レセプターTCRの構成鎖は胸腺にて発現されT細胞分化制御に大きな役割を果たすが、とりわけT細胞初期分化にはTCRα鎖を伴わないTCRβ鎖複合体(プレTCR)の発現が必須である。最近プレTCR固有の構成鎖pTαが明らかにされたが、pTα欠損マウスにおいても少なからずT細胞の成熟が観察され、pTαがプレTCRに必須の構成鎖なのかもう一度問い直すべき必要が生じてきた。pTαの発現様式とその機能を明確にするために、pTαに対する単クローン性抗体を作製すべく、まずマウスpTα細胞外領域とチオレドキシンとの融合タンパクを大腸菌にて作製した。次いで融合タンパクをハムスターに免疫して、これまで2種類の単クローン性抗体産生ハイブリドーマを得た。これらの単クローン性精製抗体はいずれもpTα細胞外領域とチオレドキシンの融合タンパクに結合しチオレドキシン単独には結合しないことから、大腸菌で産生されたpTαに特異的に結合する抗体であった。更にこれらの抗体は、正常マウス胸腺細胞の約2%程度への結合性を示したのみならず、 pTα陽性マウス未熟胸腺細胞株KKF及びSCB29に結合し、pTαを発現しないマウス成熟T細胞株2B4には結合しなかった。またこれらの抗体は、pTαに等しい33kDのTCRβ会合表面タンパクを未熟胸腺細胞株より免疫沈降した。更に、この抗体はマウスpTαの全長cDNAを発現させたCOS7細胞を特異的に染色した。以上の結果から、得られた単クローン性抗体はマウスpTα細胞外領域に特異的な抗体であると考えられた。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Yousuke Takahama: "Functional competence of Tcells in the absence of GPI-anchared protein" European Journal of Immunology. 28. 2159-2166 (1998)
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[Publications] Shinya Tamura: "Expression and function of c-Met during thymocyte development" Scandinavian Journal of Immunology. 47. 296-301 (1998)
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[Publications] Takehiko Sugawara: "An improved retroriral gene transfer fedmique demonstrates inhibition of CD4-CD8- thymocyte development by kinase inactive ZAP-7" Journal of Immunology. 161. 2888-2894 (1998)
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[Publications] Yayoi Tokoro: "A mouse carrying genetic defect in the choice between T and B lymphocytes" Journal of Immunology. 161. 4591-4598 (1998)
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[Publications] Takehiko Sugawara: "Differential rules of ERK and p38 MAP kinase pathways in positive and negative selection of T lymphocytes" Immunity. 9. 565-574 (1998)
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[Publications] Takehiko Sugawara: "Preferential involvement of distinct MAP Knase cascades in clonal selection of T lymphocytes" Proceedings of International Congress of Immunology. 10. 49-53 (1998)
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[Publications] Lisa Spain: "Developmental Biology Protocols" R.S.Tuan and C.W.Lo (eds.) Humana Press,NJ,USA, (1999)
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[Publications] Yousuke Takahama: "Protocols in T cell development and activation" K.P.Kearse (ed.) Humana Press.,NJ,USA, (1999)
