1999 Fiscal Year Annual Research Report
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10670297
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
高濱 洋介 徳島大学, ゲノム機能研究センター, 教授 (20183858)
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| Keywords | Tリンパ球 / 胸腺 / 細胞分化 / プレTCR / TCR複合体 / pTα / 単クローン性抗体 |
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| Research Abstract |
Tリンパ球抗原レセプターTCRの構成鎖は胸腺にて発現されT細胞分子化制御に大きな役割を果たす。とりわけT細胞初期分化にはTCRα鎖を伴わないTCRβ鎖複合体(プレTCR)の発現が必須である。最近プレTCR固有の構成鎖pTαが明らかにされたが、pTα欠損マウスにおいても少なからずT細胞の成熟が観察され、pTαがプレTCRに必須の構成鎖なのかを含めてpTαのTリンパ球分化における機能をもう一度問い直すべき必要が生じてきた。そこで本研究では、pTαの発現様式とその機能を明確にするために、pTαに対する単クローン性抗体を作製した。得られた単クローン性抗体は,pTα細胞外領域とチオレドキシンの組換え融合タンパクに結合し、チオレドキシン単独には結合しないことから、組換えpTαに特異的に結合する抗体であった。またこの抗体は、正常マウス胸腺細胞の約2%程度への結合性を示したのみならず、pTα陽性マウス未熟胸腺細胞株KKF及びSCB29に結合し、pTαを発現しないマウス成熟T細胞株2B4には結合しなかった。更にこの抗体は、KKF細胞よりpTαに等しい33kDのTCRβ会合表面タンパクを免疫沈降し、マウスpTαの全長cDNAを発現させたCOS7細胞を特異的に染色した。以上の結果から、得られた単クローン性抗体はマウスpTα細胞外領域に結合性を示す抗体であると考えられた。ところが今年度になって、この抗体はpTαを発現しない細胞のうち成熟Bリンパ球の一部にも結合性を示すことが判明し、この抗体が真にpTα特異的な抗体とはいえない可能性が生じてきた。そこで現在、新たなpTα特異的抗体のスクリーニングを再開すると共に、この抗体が結合するBリンパ球分子がどのような性状の分子であるのか新規pTα近縁分子を同定できる可能性を検証すべく解析を進めている。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Kaneta,M.,et al.: "A role for Pref-1 and HES-1 in thymocyte development"J.Immunol.. 164. 256-264 (2000)
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[Publications] Apostolou,I.,et al.: "Murine natural killer T cells contribute to the granulomatous reaction caused by mycobacterial cell walls."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 96. 5141-5146 (1999)
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[Publications] Sugawara,T.,et al.: "Differential roles of ERK and p38 MAP kinase pathways in positive and negative selection of T lymphocytes."Immunity. 9. 565-574 (1998)
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[Publications] Tokoro,Y.,et al.: "A mouse carrying genetic defect in the choice between T and B lymphocytes."J.Immunol.. 161. 4591-4598 (1998)
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[Publications] Sugawara,T.,et al.: "An improved retroviral gene transfer technique demonstrates inhibition of CD4-CD8- thymocyte development by kinase-inactive ZAP-70."J.Immunol.. 161. 2888-2894 (1998)
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[Publications] 高浜洋介: "T細胞抗原受容体シグナルによる細胞運命の分岐"細胞工学. 19. 214-220 (2000)
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[Publications] Spain,L.M.,et al.: "Retroviral infection of T cell precursors in thymic organ culture."Developmental Biology Protocols Vol.1.2.. (In press). (2000)
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[Publications] Takahama,Y.: "Differentiation of mouse thymocytes in fetal thymus organ culture."T Cell Protocols.Development and Activation. 37-46 (1999)
