| Research Abstract |
最近,タバコ煙中のニコチンが直接肺上皮細胞に作用し,種々の遺伝子の発現を直接制御することにより,発癌やその他の呼吸器疾患の発症や病態修飾に関わることが明らかにされつつある.今研究において,平成11年度には昨年度に引続きgastrin releasing peptide(GRP)の前駆体であるproGRPと,GRP受容体(GRPR)をコードする遺伝子の肺上皮細胞における発現とその制御機構についての研究を遂行した.すなわち,小細胞肺癌(SCLC)細胞株(SBC5,H128)ないし非小細胞肺癌(NSCLC)細胞株(H441,HS-24,A549)を用いて,proGRPおよびGRPR遺伝子の発現制御をmRNAレベルで半定量的RT-PCR法を用いて検討した.まずSCLC株H128細胞において,ニコチン1mM,24時間曝露によりproGRP,GRPR両遺伝子の発現の増強が認められた.さらにNSCLC株HS-24およびA549細胞においてGRPR遺伝子の発現がニコチン刺激により濃度依存的に増強した.これらの観察結果はタバコの成分中,とくニコチンがこれらの発現増強作用に強く関わっていることを示唆しており,ニコチンのtumor promoterとしての作用や細胞の分化,増殖にもGRPを介して能動的に関与していることが推測された.さらに,肺上皮細胞におけるニコチン性アセチルコリン受容体(nAchR)のうち,subtype-α5,-α7の発現に対するニコチンの作用も合わせて検討した.肺の上皮細胞にはこれまで報告されてきた如く,nAchRのうち少なくともsubtype α5,およびsubtype-α7の発現が認められるが,今年度の我々の検討結果から,nAchR-5α mRNAは検討したすべての肺上皮細胞にconstitutiveに発現され,さらにニコチン刺激によって明らかな発現の増強効果が濃度依存的に認められた.一方,nAchR-α7遺伝子のmRNA発現は細胞種によってその様相が異なり,HS-24,SBC5細胞では定常状態で発現され,ニコチン刺激による発現量の変化は観察されなかったが,A549細胞では無刺激では発現は認められないものの,ニコチン曝露により濃度依存的に発現誘導が認められた.また,H128細胞ではニコチンの刺激の有無に関わらず,nAchR-α7遺伝子発現は観察されなかった.現在,ニコチンによるnAchR subtype-α5,-α7遺伝子の発現誘導と,proGRPおよびGRPR発現増強との相互作用に関し,検討を進めている.
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