1998 Fiscal Year Annual Research Report
ディフェレンシャルディスプレイ法による心不全特異的な心筋遺伝子発現の検出と同定
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10670646
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
木原 康樹 京都大学, 医学研究科, 助手 (40214853)
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Keywords | 心肥大 / 心不全 / RT・PCR |
Research Abstract |
本研究は、我々の開発したダール食塩感受性ラット心全移行モデルにdifferential display RT PCR法(DD法)を応用することにより、代償心肥大期と非対象心肥大期の間での遺伝子発現の差異を明らかにし、心不全期に特異的発現を示す遺伝子について抽出、クローニングする。これにより心不全移行期の際に誘導的役割を演ずるシングナリング系の存在を提示することを目的とする。DD法は2種類以上のサンプルを比較して、微妙な変化を含めた様々な挙動の転写物を同時に同定できることを特徴としている。実験対象とするダース食塩感受性ラットは、短期間に均一な経過で代償された求心性左室肥大より代償破綻した収縮性の低下した遠心性左室拡大への移行を呈する。遺伝学的にも純系化が確認されており、本研究にも適当である。本年度において肥大期・不全期左室心筋、及び不全期右室心筋より各々のRNA抽出を終了する予定である。次年度では、得られたフィンガープリントの比較を行い、挙動が一致していないバンドに相当するcDNAをゲルスライスPCRにて再増幅し、その産物を用いてTAクローニングを定法にて行う。得られたコロニーから、インサーとチェック、シーケンスおよび制限酵素マッピングにより目的のクローンを含むものを選択・同定する。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Takagi S: "Slow inactivation of cardiac L-type Ca^<2+> channel induced by cold acclimatization of guinea pig." Am.J.Physiol.274. R348-R356 (1998)
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[Publications] Morii I: "Myocardial contractile efficiency and oxygen cost of contractility are preserved during transition from compensated hypertrophy to failure in rats with salt-sensitive hypertension." Hypertension. 31. 949-960 (1998)
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[Publications] TanakaT: "Marked elevation of brain natriuretic peptide levels in pericardial fluid closely associated with left ventricular dysfunction." J.Am.Col.Cardiol.31. 399-403 (1998)
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[Publications] Iwanaga Y: "Cardiac endothelin-i plays a critrcal role in the functional deterioration of left ventricies during the transition from compensatory hypertrophy to congestive heart failure in saltsensitive hypertensive rats." Circulation. 98. 2065-2073 (1998)
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[Publications] Takagi S: "Cold acclimation of guinea-pig depressed contraction of cardiac papillary muscle." Am.J.Physiol.(in press).
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[Publications] Takagi S: "Cardiovascular effects of tilisolol,a non-selective beta-adrenergic blocker." Cardiovascular Drug Reviews. 16. 105-117 (1998)
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[Publications] 木原康樹: "心不全。井村裕夫 編、分かりやすい内科学" 文光堂(in press), (1998)