1998 Fiscal Year Annual Research Report

高発癌を示す遺伝性老化症候群の分子病態、治療法に関する研究

Research Project

Project/Area Number	10670719
Research Institution	Gifu University
Principal Investigator	金子英雄岐阜大学, 医学部, 助手 (80293554)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	深尾敏幸岐阜大学, 医学部附属病院, 助手 (70260578)
Keywords	Bloom症候群 / Ataxia-telangiectasia / イムノブロット / ヘリカーゼ活性 / BLM / ATM / 核移行シグナル
Research Abstract	Bloom症候群(BS)、Ataxia-telangiectasia(A-T)はともに、高発癌、免疫不全を呈する遺伝疾患である.病因遺伝子BLM,ATMの機能解析を通して診断、治療につなげるため以下の研究をおこない成果を得た. 1, 日本人A-T患者の変異解析: 日本人A-T患者ではIVS33+2T→Aと7883del5という変異が比較的 commnonな変異であることを明かにした.また、無刺激のPBLではATMタンパクが健常人でも検出できないがEB細胞またはPBLをPHAで刺激すると検出可能となった.患者EB細胞株、および患者PHA刺激PBLではATMタンパクが検出されないことからイムノブロットによる患者スクリーニングが可能となった. 2, BLMヘリカーゼ活性の測定: BLMのヘリカーゼ領域をGSTベクターに組み込み大腸菌に大量発現させた.Glutathione-Sepharose4Bで融合タンパクを回収後、トロンビンできりだしBLMのヘリカーゼ領域のみを回収することができた.^<32>pでラベルしたoligo DNAをM13のベクターにannealingさせ基質とした.この基質とBLMヘリカーゼ領域をATPの存在下、または非存在下で反応させた.融合タンパクはATPの存在下でのみヘリカーゼ活性を示した. 3, BLMの核移行シグナルの解析: BLMの遺伝子とGreen fluorescent protein(GFP)の融合タンパクをHeLa細胞に発現させ、細胞内の局在を観察した.BLMのC-末に2つの塩基性アミノ酸クラスターが存在しBLMの核移行シグナルとして機能することを明かにした.さらに、この部位に変異を導入し核局在の有無を観察したところ、遠位のアミノ酸のKRRが重要であることが明かになった.さらに、マウスBLMも同様にC-末に核移行シグナルを有することを明かにした.

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kaneko H., et al.: "Expression of Pax5 gene in human hematopoietic cells and tissues : comparison with immunodelicient donors." Clin.Exp.Immunol.111. 339-344 (1998)
[Publications] Tashita H., Kaneko H., et al.: "Molcular basis of selective IgG2 deficiency. The mutated membrane-bound form gamma2 heavy chain caused complete IgG2 deficiency in two Japanese siblings." J.Clin.Invest.101. 677-681 (1998)
[Publications] Fukao T., Kaneko H., et al.: "A novel exonic mutation (5316 G to A) resulting in two aberrantly spliced transcripts of be ATM gene in a Japanese patient with ataxia-telangiectasia." Human Mutation. S223-S225 (1998)
[Publications] Fukao T., Kaneko H., et al.: "Ataxia-telangiectasia(A-T)in the Japanese population : identification of R1917X, W2491R, IVS33+2t>a, and 7883del5, the latter two being relatively common mutations." Human Mutation. 12. 338-343 (1998)
[Publications] Yamada Y., Kaneko H., et al.: "Ataxia telangiectasia associated with B-cell lymphoma : The effect of a half-dose of the drugs administrated according to the acute lymphoblastic leukemia standard risk protocol." Pediatric Hematology and Oncology. 15. 425-429 (1998)
[Publications] Teramoto T., Kaneko H., et al.: "Serum IgE level is negatively correlated with the ability of peripheral mononuclear cells to produce interferon gamma." Clin.Exp.Allergy. 28. 74-82 (1998)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

高発癌を示す遺伝性老化症候群の分子病態、治療法に関する研究

Principal Investigator

金子 英雄 岐阜大学, 医学部, 助手 (80293554)

Research Products

[Publications] Kaneko H., et al.: "Expression of Pax5 gene in human hematopoietic cells and tissues : comparison with immunodelicient donors." Clin.Exp.Immunol.111. 339-344 (1998)

[Publications] Tashita H., Kaneko H., et al.: "Molcular basis of selective IgG2 deficiency. The mutated membrane-bound form gamma2 heavy chain caused complete IgG2 deficiency in two Japanese siblings." J.Clin.Invest.101. 677-681 (1998)

[Publications] Fukao T., Kaneko H., et al.: "A novel exonic mutation (5316 G to A) resulting in two aberrantly spliced transcripts of be ATM gene in a Japanese patient with ataxia-telangiectasia." Human Mutation. S223-S225 (1998)

[Publications] Fukao T., Kaneko H., et al.: "Ataxia-telangiectasia(A-T)in the Japanese population : identification of R1917X, W2491R, IVS33+2t>a, and 7883del5, the latter two being relatively common mutations." Human Mutation. 12. 338-343 (1998)

[Publications] Yamada Y., Kaneko H., et al.: "Ataxia telangiectasia associated with B-cell lymphoma : The effect of a half-dose of the drugs administrated according to the acute lymphoblastic leukemia standard risk protocol." Pediatric Hematology and Oncology. 15. 425-429 (1998)

[Publications] Teramoto T., Kaneko H., et al.: "Serum IgE level is negatively correlated with the ability of peripheral mononuclear cells to produce interferon gamma." Clin.Exp.Allergy. 28. 74-82 (1998)

金子英雄岐阜大学, 医学部, 助手 (80293554)