1999 Fiscal Year Annual Research Report
グルコース6リン酸脱水素酵素(G6PD)遺伝子と薬剤耐性に関する研究
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10670934
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
塚本 憲史 群馬大学, 医学部, 助手 (10292583)
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| Keywords | グルコース6リン酸脱水素酵素 / 薬剤耐性 / cyclophosphamide / transfection / 還元型グルタチオン |
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| Research Abstract |
グルコース6リン酸脱水素酵素(G6PD)が薬剤耐性に関与するかをみるために、ネオマイシンで選択可能なEukaryocyte系expresion vector PCDNA 3.1(-)に1.6kbのcoding regionのみに短縮したG6PD遺伝子cDNAを組み込んだPCDNA3/G6PDと、それを反対方向に組み込んだPCDNA3/G6PD-Rを作成した。これらvectorおよびPCDNA3.1(-)を培養細胞cos 7, k562にTransFastないしはTransferrifectionを用い、Transfedtionを行った。G418で選択後2〜3週間後にstable transfetantを得た。 PCDNA3.1(-),PCDNA3/G6PD-Rを導入した細胞ではmRNA,タンパクの発現に差はなかった。一方PCDNA3/G6PDを導入した細胞ではmRNAの発現が増強する傾向があったが、その強度は1.5倍以内にとどまった。G6PDタンパクの活性は0.18μmole/mg protein, 還元型グルタチオン6.4U/10^6cellsで、対照0.13, 4.5Uと比し、やや高値であったが顕著な差ではなく、LC90も10μM vs 5.5μMであった。臨床検査を用いた検討では慢性リンパ性白血病(CLL)10例、既治療例6例で差はなく、また前リンパ球性白血病PL2例、治療抵抗性の白血化症例3例でもmRNAタンパクの発現はなかった。以上より、G6PD遺伝子が薬剤耐性獲得に関与する直接的なdataは今のところ得られていない。しかし、G6PDのmRNA、タンパクが遺伝し導入した細胞で十分発現しているとはいい難くG6PD遺伝子を組み込んだレトロウイルスベクターを作成中である。
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[Publications] Tsukamoto Noritumi: "Enhanced expressions of glucoee-6-phosphate dehydrogenese And cytosolic aldehyde dehydrogenese and elevation of reduced"Blood Cell Mol Dis. 24. 231-238 (1998)
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[Publications] Saitoh Takayuki: "Myelodysplastic Syndromes with nephrotic Syndrome"Am J Hematol. 60. 200-204 (1999)
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[Publications] Tamura Junichi: "Successful treatment of combination therapy of Sulfamethoxazone-trimethoprim and predrinsolone"Kitakanto Med J. 48. 481-483 (1998)
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[Publications] Karasawa. Masamitsu: "Clinical outcome in three patients with myelodysplastic Syndrome showing polyclonal hematopoiesis"Acta Haematol. 101. 46-49 (1999)
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[Publications] Murakami Hirokazu.: "A staging system for multiple myeloma based on the morphology of myeloma cells"Eur J Haematol. 62. 63-67 (1999)
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[Publications] Tsukamoto Noritumi: "COPBLAM/MEVMP regimen for intermediate-grade non-Hodgkim's lymphoma"Kitakanto Med J. 50. 99-105 (2000)
