染色体17P13領域に存在する巨核芽球性白血病関連遺伝子のクローニング

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10670935
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 佐藤 武幸 千葉大学, 医学部, 助教授 (30187207)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大木 操 国立がんセンター研究所, 部長 (00158792) ; 丹沢 秀樹 千葉大学, 医学部, 教授 (50236775) ; 布施 晃 国立感染症研究所, 室長 (60110300)
• Keywords: 巨核芽球性白血病 / 細胞株 / 17番染色体 / 遺伝子クローニング

Research Abstract

我々が樹立した巨核球系細胞株4種全てに17番染色体異常が認められた。CMKおよびCMYは17P13転座又は17番染色体欠失、CMSは17P13転座、CTSは17番染色体欠失が認められ、17番染色体特に17P13領域に何らかの発癌(特に巨核球系)に関連した遺伝子の存在が推定された。特にCMYについては、樹立前の細胞(患者芽球)には17番染色体異常は認められず、その後治療抵抗性を示す中で増加してきた芽球中にCMYと同様の17番染色体異常を示すクローンが増加してきた。すなわち樹立時には検出不可能のレベルのマイナークローンとして存在した細胞からCMYが樹立し、その後そのクローンが治療低抗性を示して患者の中で増殖した事が推察された。これにより17P13上に、治療低抗性、細胞株の樹立と関係した遺伝子の存在が示された。
17P13上には癌抑制遺伝子であるP53遺伝子の局在が知られている。そこで、CMYおよび培養前の芽球についてP53の発現をSSCP法にて解析したところ、CMYではP53遺伝子のExon5に異常を認めたが、培養前の芽球においては異常は認められず、P53遺伝子の異常は株化によって発生した付加的な異常であり、患者芽球における17Pの異常には関係しないことが明らかになった。
我々は現在CMK、CMY、CMSにおいて17P13の異常部位が同一否か、17P13近傍の複数の遺伝子を色素ラベルし、FISH法による解析を始めている。またdifferential display法およびrepresentational difference analysisを利用し、同部に存在する遺伝子のクローニングをすすめている。

Research Products

• [Publications] Wang, X . L.: "Localization of a tumor suppressor gene associated with human oral cancer on 7q31.1"Int. J. Cancer. 75. 671-674 (1998)
• [Publications] Sato, T.: "Binding of thrombopoietin to human megakaryocytes and its regulation by thrombopoietin and phorbol ester"Br. J. Haematol.. 100. 704-711 (1998)
• [Publications] Miura, N.: "Establishment of a new human megakaryoblastic cell line, CMY, with chromosome 17p abnormalities"Int. J. Mol. Med.. 1. 559-563 (1998)
• [Publications] Sato, T.: "HIV infection of megakaryocytic cell lines"Leuk. Lymph.. 36. 397-404 (2000)
• [Publications] Toyoda, Y.: "Six months of maintenance chemotherapy following intensified treatment for acute lymphoblastic leukemia of childhood"J. Clin. Oncol.. (in press).