1998 Fiscal Year Annual Research Report
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10670986
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
桑原 道雄 東京医科歯科大学, 医学部, 講師 (60221230)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 成 東京医科歯科大学, 医学部, 助教授 (60170677)
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| Keywords | 分子生物学 / 細胞周期 / C. elegans / 水チャネル |
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| Research Abstract |
1. 新規水チャネルであるAQP9をクローニングした。AQP9mRNAの発現は白血球にもっとも多く認められた。アミノ酸の相同性からAQP9はAQP3、AQP7とともに1つのグループを形成すると考えられたが、AQP3、AQP7が尿素とグリセロールの透過性をも有するのに対して、AQP9は尿素の透過性のみ認め、特異的な機能を有することが判明した。
2. 腎性尿崩症患者の遺伝子解析を行い、バゾプレシン感受性水チャネルであるAQP2の遺伝子異常を同定した。患者は父親由来のT125M、母親由来のG175Rという2つのアミノ酸変異を有する複合へテロ接合体であった。これらAQP2変異体の機能解析では、細胞内トランスロケーションの異常は認められず、蛋白自体の機能低下が腎性尿崩症の発症原因と考えられた。
3. ロバスタチンのメサンジウム細胞増殖抑制の機序を検討した。ロバスタチンは網膜芽腫蛋白のリン酸化を阻害し、cyclin-dependent-kinase(CDK)2-およびCDK3-結合性p27Kipl蛋白を増加させたが、網膜芽腫蛋白のmRNAレベルには影響を与えなかった。また、ロバスタチンが細胞周期を抑制したことから、p27Kipl蛋白の転写調節を刺激または異化を抑制することが示唆された。
4. ヒトAQP8をクローニングするとともに染色体遺伝子を解析した。AQP8は水特異チャネルであるにもかかわらず、その遺伝子は5個のイントロンを有し、系統発生学上の由来が異なることが示唆された。
6. 線虫C.elegansのMIP蛋白を、アフリカツメガエル卵を用いた発現系にて機能解析を行い、水チャネルであることを同定した。このチャネルAQP-CE1は水な他に尿素透過性を有していたが、グリセロール透過性は認められなかった。
7. 腎ライブラリーの作製し核内受容体DNAの単離を試みているが、現在のところ断片しか得られていない。今後、新たに腎ライブラリーを作製する予定である。
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[Publications] K. Ishibashi: "Cloning and functional expression of a new aquaporin(AQP9)abundantly expressed in the peripheral laukoeytes permeable to water and urea, but not glycerol" Biochem. Biophys. Res. Commun.244. 268-274 (1998)
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[Publications] K. Goji: "Novel mutations in aquaporin-2 gene in femals siblings with nephrogenic diabetes insipidus : Evidence of disrupted water channel function" J. Clin. Endcrin. Metab.83. 3205-3209 (1998)
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[Publications] Y. Terada: "Lovastatin inhibits mesangial all proliferetion via p27^<Kip1>" J. Am. Soc. Nephrol.9. 2235-2243 (1998)
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[Publications] N. Koyama: "Cloning and functional expression of human aquaporin8 cDNA and analysis of its gene" Genomics. 54. 169-172 (1998)
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[Publications] M. Kuwahara: "A water channel of the nematode C elegans and its implication for channel selectivity of MIP-proteins" Am. J. Physiol.275. C1459-C1464 (1998)
