血管新生抑制因子(AIP)の遺伝子の解析と切除各種癌組織における発現の検討

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10671147
• Research Institution: Tazuke Kofukai Medical Research Institute
• Principal Investigator: 足立 匡司 財団法人 田附興風会, 医学研究所・第5研究部, 研究員 (20291015)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 三宅 正幸 財団法人 田附興風会, 医学研究所・第5研究部, 部長 (90250076)
• Keywords: 腫瘍血管 / 血管新生抑制因子 / AIP

Research Abstract

癌の進展に伴い,血管形成を抑制することは癌治療において非常に大きな意味があると考えられる.そこで,我々は,血管内皮細胞のHUVECの遊走能に着目し,その運動を制御する因子を見つけることにした.その手段として,機能性モノクローナル抗体を作成し,そのエピトープである遺伝子をクローニングしていくことにした.得られたHM7-3抗体は,実際にニワトリの受精卵を用いた実験で,血管新生をin vivoで抑制した.また,ラットの角膜を用いた実験でも角膜内への血管新生を高度に抑制した.この抗体のepitopeは分子量135K,105Kの糖蛋白質と考えられ,遺伝子クローニングを行ったところ,目的遺伝子の一部と考えられる511個の塩基配列からなるcDNAをクローニングした.この構造はGenbankに登録されていなかったため,未知物質と考えられ,我々はこれをAngiogenesis inhibiting protein(AIP)と名付けた.一時,このwhole cDNAと考えられる2571個からなるcDNAをクローニングできた.
しかしながら,これをトランスフェクションしてみても,うまく血管新生制御を行うことが不可能であった.このため,むしろこの一部の蛋白構造に修飾された糖鎖構造がこのような生理的現象をもっている可能性が示唆された.現在,この抗体を用いて抗体アフィニティカラムを作製し,AIPの蛋白質部分と,糖鎖部分と精製してその構造を決定中である.

Research Products

• [Publications] Ikeda N.et al.: "Prognostic Significance of Angiogenesis in Human Pancreatic Cance"British Journal of Cancer. 79. 1564-1571 (1999)
• [Publications] Miyake M.et al.: "A Novel Molecular Staging Protocol for Non-small Cell Lung Cancer"Journal of Clinical Oncology. 18. 2397-2404 (1999)
• [Publications] Huang C.et al.: "Overexpression of Bax Associated with Mutations in the Loop-Sheet-Helix Motif of p53"American Journal of Pathology. 155. 955-965 (1999)
• [Publications] Huang C.et al.: "p16 Protein Expression Is Associated with a Poor Prognosis in Squamous Cell Carcinoma of the Lung"British Journal of Cancer. 82. 374-380 (2000)
• [Publications] Adachi M.et al.: "Significance of Integrin α5 Gene Expression as a Prognostic Factor in Node Negative Non-small Cell Lung Cancer"Clinical Cancer Research. 6. 96-101 (2000)
• [Publications] Konishi T.et al.: "The K-ras Gene Regulates Vascular Endothelial Growth Factor Gene Expression in Non-small Cell Lung Cancer"International Journal of Oncology. 16. 501-511 (2000)
• [Publications] 三宅正幸: "肺がんにおける糖鎖抗原の発現,がんの浸潤・転移 基礎研究の臨床応用"北島政樹(医学書院). 8 (1999)
• [Publications] 三宅正幸: "Key Word 1999-2000 呼吸器疾患"山木戸道郎,日和田邦男,小倉剛(先端医学社). 2 (1999)