1999 Fiscal Year Annual Research Report
三次元大脳培養浸潤モデルによるグリオーマ浸潤機構の解析とその臨床応用
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10671297
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
大西 丘倫 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (70233210)
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| Keywords | グリオーマ / 浸潤モデル / 腫瘍浸潤 / 脳切片培養 / メタロプロテアーゼ |
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| Research Abstract |
方法:生後2日の新生仔ラット脳より300μmの薄切大脳冠状切片を作成、仔経0.4μmの透明多孔膜上に乗せ、大気と培養液との境界でbrain slice cultureを行った。生細胞標識蛍光色素PKH2にて標識したT98Gグリオーマスフェロイドをbrain slice上に移植し、グリオーマ細胞の運動及び脳内浸潤動態について共焦点レーザー顕微鏡を用いて解析を行った。また、matrix met all oproteinase(MMP)のグリオーマ浸潤への影響をみるため、MMPの発現ならびにMMP阻害剤による浸潤抑制効果を調べた。
結果:T98Gグリオーマ細胞は、brain slice上を広範囲に移動し、神経接着分子L1の添加は著明にグリオーマ細胞の運動性を亢進させた。一方、時間経過と共に、グリオーマ細胞は脳組織内へ浸潤し、その浸潤の程度は共焦点レーザー顕微鏡により三次元的に定量評価することが可能であった。MMPは、グリオーマスフェロイドよりも浸潤細胞にその発現が強く見られ、MMP阻害剤の添加により、グリオーマ細胞の脳内浸潤は有意に抑制された。
結論:本研究においてbrainslicecultureを用いた浸潤モデルは、生体に近い環境下でのグリオーマ細胞の浸潤動態の定量的解析を可能にした。浸潤グリオーマ細胞はその強い遊走能により細胞移動を行っており、matrix metalloproteinase(特にMMP-2)は浸潤先端で重要な役割を演じていることが示唆された。
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[Publications] T.Ohnishi: "Quantitative analysis of glioma cell invasion by confocal laser scanning microscopy in a novel brain slice model"Biochem Biophys Res Commun. (in press).
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[Publications] Y.Kanemura: "Isolation and expression analysis of a novel human homologue of the Drosophia glial cells missing (gcm) gene"FEBS Lett. 442. 151-156 (1999)
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[Publications] T.Ohnishi: "Role of fibronectin-stimulated tumor cell migration in glioma invasion in vivo: clinical significance of fibronectin and fibronectin receptor expressed in human glioma tissues"Clin Exp Metastasis. 16. 729-741 (1998)
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[Publications] T.Ohnishi: "A novel model of glioma cell invasion using organotypic brain slice culture"Cancer Res. 58. 2935-2940 (1998)
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[Publications] T.Ohnishi: "In vitro and in vivo potentiation of radiosensitivity of malignant gliomas by antisense inhibition of the RAD51 gene"Biochem Biophys Res Commun. 245. 319-324 (1998)
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[Publications] S.Hiraga: "Telomerase activity and alterations in telomere length in human brain tumors"Cancer Res. 58. 2117-2125 (1998)
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[Publications] 大西丘倫: "免疫学からみた神経系と神経疾患"日本医学館(東京). 374 (1999)
