1998 Fiscal Year Annual Research Report
転写活性因子としての核内レセプターの機能と相互作用-in situ PCR法を用いた微量遺伝子の細胞レベルでの発現-
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10671328
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Research Institution | Nippon Medical School |
Principal Investigator |
山王 直子 日本医科大学, 医学部, 講師 (90297862)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小松原 清光 日本医科大学, 医学部, 助手
田原 重志 日本医科大学, 医学部, 助手 (80277540)
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Keywords | 核内レセプター / 下垂体 / 下垂体腺腫 / 転写因子 / レチノイド / 遺伝子 / mRNA / PCR |
Research Abstract |
エストロゲン、ステロイド、レチノイドなどは核内レセプターを介して特異的遺伝子の転写効率を制御している。下垂体細胞における核内レセプターによる転写制御とホルモン産生の関係を明らかにすべく本研究を行った。ヒト下垂体腺腫組織を対象に、in situ hybridization,免疫組織化学,polymerase chain reaction(PCR),in situ RT-PCR法を用いて核内レセプター遺伝子発現を検討した。Retinoid X Receptor(RXR)について、αβγの各アイソフォームを識別するプローブを作成し、Polymerase chain reaction(PCR)法を用いて下垂体組織におけるmRNAの局在を証明した。次にin situ PCR法を用いてパラフィン切片上で遺伝子を増幅して検出したところ、GH産生腫瘍とTSH産生腫瘍においてRXRγmRNAは全例で発現していることが明らかとなった。同時に蛋白レベルでは高感度免疫組織化学Catalyzed signal amplification法によりRXR蛋白を検出すると、RXRαは全種類の下垂体腺腫に発現するのに対し、RXRγはGH,TSH腺腫に特異的に発現し、遺伝子発現と蛋白レベルでの発現は一致していた。さらに下垂体特異的蛋白転写活性因子Pit-1とRXRγを同一細胞内で照明した。 昨年までに我々はPit-1がGH,PRL,TSH3種の細胞の分化・転写に関与することを報告し、PRL細胞におけるエストロゲンレセプターとの協調作用を報告してきたが、今年度の結果を踏まえ、GH/TSHの細胞分化と増殖にPit-1と核内レセプターの相互作用が示唆された。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Sanno N, Sugawara A, et al: "Expression of retinoid X receptor mRNA in pituitary adenomas" Endocrine Pathology. 10・1. 1-11 (1999)
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[Publications] Sanno N, Teramoto A, et al.: "Expression of Pit-1 mRNA and activin/inhibin subunits in clinically nonfunctioning pituitary adenomas" Hormone Research. 50. 11-17 (1998)
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[Publications] Sanno N, Osamura RY.: "Catalyzed reporter deposition method for amplifying endocrine products" Endocrine Pathology. 9/3. 195-199 (1998)
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[Publications] Sanno N, Shimura T, et al.: "An adult case of cerebral primitive neuroectodermal tumour" Acta Neurochir (Wien). 140. 445-446 (1998)
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[Publications] 山王直子: "ヒト下垂体腺腫における視床下部ホルモン・視床下部ホルモン受容体遺伝子の検出-in situ RT-PCR法の応用-" 日医大誌. 65. : 101-104, (1998)
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[Publications] 田原重志、長村義之、山王直子、寺本明: "分子生物学的手法による下垂体腺腫の機能分化の解析と分類" ホルモンと臨床 46(増刊号・間脳下垂体腫瘍VIII). 46. : 24-29, (1998)
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[Publications] 長村義之、山王直子: "下垂体腺腫の分子生物学 間脳下垂体の腫瘍性病変" 三輪書店(東京), 159(10) (1998)
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[Publications] 山王直子、寺本明: "ACTH産生腺腫 間脳下垂体の腫瘍性病変" 三輪書店(東京), 159(11) (1998)