ヒト腎細胞癌における細胞周期関連遺伝子の変異とその細胞生物学的特性の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10671463
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 吉田 光明 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助手 (60182789)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大島 博幸 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (60013934)
• Keywords: ヒト腎細胞癌 / 紡錘体形成チェックポイント / G1 / S境界領域 / p21 / p33 / MAD2 / BUB1

Research Abstract

本年度はさらに腎細胞癌の原発腫瘍組織を増やしRT-PCR法により細胞周期関連遺伝子の発現を解析した。また,今回転移組織も3検体入手できた。これまでに収集できた原発腫瘍20検体と同一患者からの正常腎組織,転移組織3検体および樹立細胞株10株を用いて,G1/S境界領域の制御遺伝子であるp21,p33,また,紡錘体形成チェックポイント遺伝子であるBUB1,MAD2の4種類の遺伝子について発現を解析した。その結果,p21については17検体,p33は10検体において解析が可能であった。これらのうちp21は15検体において発現が認められた。また,p33は解析した全ての組織において発現が検出された。細胞株ではp21,p33共に一株を除く9株全てに発現が認められた。このようにp21,p33については解析した殆どの検体において発現が検出されていることから,腎癌の発生・進展には関連性がないものと考えられる。一方,紡錘体形成チェックポイント遺伝子であるMAD2については22検体において解析ができ,そのうち12検体に発現が検出されなかった。また,BUB1については3種類のプライマーを用い,それぞれ22検体,16検体,16検体において解析を行ったが,第1プライマーでは21検体(95%=21/22),第2では14検体(87%=14/16),第3では13検体(81%=13/16)において発現が認められなかった。紡錘体形成チェックポイント遺伝子は分裂細胞において、染色体の娘細胞への分配を監視しており,もし,これらの遺伝子が機能を失うと染色体異常が生じても監視機構が作動せず,染色体異常をもつ細胞が形成されることになる。これが結果として細胞の悪性化を導くと考えられる。今回の解析においてBUB1,MDA2の発現消失が高頻度に認められたことは腎細胞癌の発生初期において何らかの関与を有している可能性がある。

Research Products

• [Publications] Z-Q.Yang et al.: "Molecular cygogenetic analysis of 17 renal cell cancer cell lines: Increased copy number at 5g31-33 in cell lines from nonpapillary carcinomas."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 156-163 (2000)
• [Publications] D. Akanuma et al.: "In activation patterns of the p16 (INK4a) gene in orsl squamous cell carcinoma cell lines."Oral Oncology. 35. 476-483 (1999)
• [Publications] K. Mitsuya et al.: "LTI1, an imprinted antisense RNA in the human KvLQT1 locus identified by screening for diffentially expressed tramscripts using monochromosomal hybrids."Hum. Mol. Genet.. 8. 1209-1217 (1999)
• [Publications] 奈良信雄、池内達郎、吉田光明、小原深美子、東田修二: "遺伝子・染色体検査学"医歯薬出版株式会社. 314 (1999)