c-FOS、cーJUN蛋白発現からみた脳神経細胞障害発生機序の解明

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10671538
• Research Institution: Tottori University
• Principal Investigator: 長田 直樹 鳥取大学, 医学部・附属病院, 助手 (10240863)
• Keywords: 低酸素虚血性脳障害 / 週生期 / 未熟脳

Research Abstract

(1)新生仔ラットの低酸素性虚血性脳障害モデルを用い、90分間連続負荷と、10分間負荷10分間間欠の9回繰り返しの反復負荷の2法を行い低酸素虚血ストレスに対する反応を観察した。まず、低酸素虚血負荷中の脳血流量動態と一酸化窒素(NO)の動態を調べた。脳血流量はいずれの方法でも、虚血側において負荷開始後、前値の30%まで減少した。負荷終了後には直ちに脳血流量は前値に復した。NOは負荷中血流量の低下に応じて発生したが、間欠期に血流量が回復してもなお発生がみられた。負荷終了後の回復期にもNO発生の再上昇がみられ、脳障害発生との関与が示唆された。
(2)低酸素虚血負荷による、inducible nitric oxide synthase(iNOS)およびNOとO_2ーとの反応産物であるperoxynitrite 発生を検討した。またiNOSの選択的阻害剤であるS-methyl-isothiourea sulfate(SMT)を腹腔内投与し、障害発生の程度とperoxynitrite発生の指標となる3ーnitrotyrosine(NT)発現の観察を行った。負荷6ー36時間後にiNOS mRNAの発現が、負荷12ー48時間後にiNOS蛋白の発現が観察された。NTは虚血側優位に発現し、48時間で最大となった。また、SMT投与により虚血側脳梗塞巣は有意に減少し、NTの発現は抑制された。
(3)さらに1回目の負荷後にさまざまな時間感覚で反復負荷を行ったところ、iNOS活性の上昇した時間における反復負荷によって障害は拡大し、一方で、iNOS阻害剤の投与により障害拡大が抑制された。これらの成績より、周生期未熟脳において、低酸素虚血負荷によるiNOSの発現とperoxynitrite産生亢進が脳障害増悪に関与する事が示唆された。

Research Products

• [Publications] Ikeno S: "Immature Brain Injury via peroxynitrite Production Induced by Inducible Nitril Oxyde Synthase after Hypoxia-Ischemia in Rat"J Obstet Gynaecol Res. 26・2(in print). (2000)
• [Publications] 長田直樹: "反復低酸素負荷による脳障害発生と一酸化窒素"周産期学シンポジウム. 16巻. 31-35 (1998)